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Une question d'immunologie, délicate (pour moi) - Problèmes de HLA -



  1. #1
    Peu inspiré

    Une question d'immunologie, délicate (pour moi) - Problèmes de HLA -


    ------

    Bonjour à toutes et tous,

    Je prépare actuellement une manip, et je m'interroge vivement sur la possibilité et la "relevance" de ladite manip.

    Voici le problème :
    Admettons que je possède un donneur HLA-A2, HLA-A3, HLA-B10, etc etc

    Je génère des cellules dendritiques (DC) à partir des monocytes de ce patient et je charge ces DC avec un antigène X.
    J'ajoute ensuite sur mes DC, des lymphocytes T CD8 (+IL2) du même donneur. Je vais ainsi stimuler un certain nombre de LT CD8 dont le TCR est spécifique soit :
    - Du complexe HLA-A2-peptide antigénique X
    - Du complexe HLA-A3-peptide antigénique X
    - Du complexe HLA-B10-peptide antigénique X
    etc etc

    Je compte ensuite trié uniquement les LT CD8 qui ont répondu à la stimulation (peu importe le complexe HLA-peptide reconnu par le TCR. Pour le tri, je passe mes cellules au trieur (cytométrie en flux) et je récupère les cellules CD8+ / CD107a+ (marqueur de dégranulation et donc d'activation/stimulation).

    Enfin la phase finale : Ces LT CD8 stimulés, triés, [dont le TCR est spécifique soit
    - Du complexe HLA-A2-peptide antigénique X
    - Du complexe HLA-A3-peptide antigénique X
    - Du complexe HLA-B10-peptide antigénique X
    etc etc (je radotte ) ]

    Bref je reprends, ces LTCD8 stimulés (et après quelques jours de repos) vont être mis en présence d'une lignée cellulaire (humaine) qui exprime l'antigène X, et qui est HLA-A2 (comme mon donneur), mais aussi HLA-A4, HLA-B12 (enfin bref seul HLA-A2 en commun avec mon donneur).

    Je compte ensuite réalisé un test de cytotoxicité de ces LT CD8 contre cette lignée cellulaire.

    D'où ma question :
    Vais-je mesurer uniquement et spécifiquement une réponse de mes LT CD8 dont le TCR reconnait spécifiquement complexe HLA-A2-peptide antigénique X ?

    ou bien

    Est-ce que je risque de provoquer une réponse de type allogénique de la part de mes autres LT CD8 (dont le TCR est malgré tout spécifique d'un contexte HLA-peptide antigénique X précis) ?

    Merci à tout ceux qui auront eu le courage de me lire ^^ Et plus encore, (une éternelle reconnaissance serait même envisageable) à ceux qui sauront me répondre ^^

    PS : Si vous avez des liens et/ou des références bibliographiques qui permettraient de m'aider à répondre à cette quesiton, je suis preneur .

    -----

  2. #2
    Peu inspiré

    Re : Une question d'immunologie, délicate (pour moi) - Problèmes de HLA -

    Je m'excuse platement pour ce doublon, mais j'ai oublié de préciser que je ne pouvais et ne souhaitais pas faire cette manip (que ce soit pour la stimulation et/ou la cytoxicité) uniquement avec des LT CD8 restreints à un contexte HLA-A2.

  3. #3
    Pjzbbsection

    Re : Une question d'immunologie, délicate (pour moi) - Problèmes de HLA -

    Bonjour,
    Je suis également intéressé par une éventuelle réponse

  4. #4
    berzelius

    Re : Une question d'immunologie, délicate (pour moi) - Problèmes de HLA -

    grande question : les lt cd8 ils sont récupérés comment? par quelle technique? ( certaines techniques d'isolement activent les cellules ) mais je suis curieux de la reponse aussi ...désolé de pas avoir de rep ^^
    "le campbell est ton ami, mais un mauvais oreiller..."

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