fixation de coupe de tissu sur lame de verre pour un microdissecteur laser
j'utilise un microdissecteur laser. Cet appareil permet de récupérer spécifiquement les cellules qui nous interessent sur des coupes de tissus. Je travaille sur des coupes de tissus provenant du colorectal. Mon problème est que je n'arrive pas à décoller les cellules car elles sont trop fixées à la lame de verre.
J'ai essayé de faire varier les temps de deshydratation, de mettre mes lames de verres au frigo avant de mettre ma coupe de tissu sur la lame en vain SVP aidez-moi
Bonjour,
J'ai une amie qui bosse sur la microdissection laser. Elle utilise apparemment pas les mêmes appareillage que toi pour préparer sa coupe. Apparemment ses échantillons sont sur une membrane maintenu par un anneau métallique. Elle fait ses coupes et retire l'anneau (contenant donc des trous dû à la dissection)
Vois tu un peu de quel genre de matériel elle dispose ? Si oui, peut etre est ce une alternative.
Sinon, pour ton exemple, souhaites tu conserver tes cellules intactes ? ou récupérer du matériel intracellulaire ?
Akïn
je veux récupérer la totalité du contenu intracellulaire, ADN,ARN protéines. Les tissus proviennent d'une tumorothèque. je prends mes tumeurs du colon ensuite je fais des coupe de 10µm d'épaisseur et je les mets sur une lame de verre. Mon problème est la. Je veux que ma coupe de tissu du colon se fixe sur la lame de verre mais pas très fort car sinon au microdissecteur laser les cellules ne peuvent pas se coller au film.
Quel type de lame utilise-tu?
Bonjour,
Quel système d'appareil utilisez-vous ? PALM, Arcturus, Nikon ou Leica ?
En cas d'utilisation de lame histologique simple, pour cette technique il faut d'abord proscrire les lames superfrost. Sinon, vos lames doivent être simplement lavées à l'eau, éventuellement au savon, puis à l'alcool pour bien les dégraisser, avant de les autoclaver si vous travaillez sur du matériel nécessitant des conditions stériles (ARN notamment).
Cordialement
Microlaser220
