Choix de l'éluant en hplc

[inviteffd103ed]

Bonjour,
Je suis en stage et on m'a demandé d'établir un protocole de dosage du formate et de l'acétate de l'hplc. Pour celà, on m'a dit que je peut utiliser un éluant avec 3% d'acétonitrile et 97% de solution d'acide phosphorique à pH 2.1.
J'ai au préalable fait des tests avec des solutions étalons de formate et d'acétate mais voyant que mes pics n'étaient pas séparés j'ai renouvelé l'opération avec des éluants de différentes concentrations. J'en ai déduit que ces composés sont mieux séparés en absence d'acétonitrile.
Je me demande alors l'intéret de l'acétonitrile dans l'éluant.

quelqun pourrai t il compléter mes connaissances sur le sujet
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[invite75a6eeed]

Bonjour,
Pour une HPLC en phase inverse ta colonne est hydrophobe. Elle retiendra donc les composés hydrophobes. L'acetonitrile (par rapport à l'eau) permet d'éluer les composés trop retenus. Donc en jouant sur le pourcentage d'eau et d'acetonitrile tu peux jouer sur le temps de rétention de tes composés et ainsi améliorer la séparation. Augmenter l'acetonitrile diminue les temps de rétention mais aussi la séparation...

[inviteb801c3e3]

slt tou le monde
en realité jé besoin de votre aide tous
je narive pa a distingué entre tou lé type de chromatographie
qell é la relation solvan-colonne-soluté
le choix du solvan

i need y help

voila mon mail pour : osajima_stoll@yahoo.fr

dont forget me