Choix d'une colonne HPLC.
Bonjour à tous,
Bien que ces paramètres interagissent les uns sur les autres, j'aimerais savoir lequel est le plus important lors du choix d'une colonne HPLC:
- type de phase stationnaire
-longueur
-diamètre
- débit d'éluant supportable par la colonne.
Merci par avance pour vos réponses.
Il n'y a pas de réponse "toute faite"
le débit d'éluant supportable doit être choisi en fonction du reste de ton système HPLC (notemment des pompes)
le type de phase dépend du type de composés que tu vas analyser (phase chirale pour séparer des énantiomères par exemple, phase normale ou phase inverse selon la polarité de tes produits...)
Ensuite le pouvoir de séparation de ta colonne est donné par le nombre de plateaux théorique... la longueur et le diamètre ne sont pas vraiment significatifs
Merci Cephalotaxine, ta réponse m'a éclairée sur le sujet.
A bientôt.
Salut, en fait pour chaque type de colonne il existe un débit d'éluant idéal pour lequel l'efficacité de la séparation est maximale. De même, un débit trop fort peut provoquer des traînées de pic. La granulométrie à savoir la taille des billes de silice (le cas échéant) est également importante, plus la taille des billes est petite meilleure sera l'efficacité de la séparation.
Je dirais quand meme que le plus important est le chix de la phase stationnaire, les autres paramètres étant à adapter en fonction de la qualité de séparation voulue.
Le second paramètre sera la granulométrie, selon moi, qui joue beaucoup sur la qualité de séparation. Cependnat en fonction de l'appareillage on pourra pas utiliser n'importe quel granulométrie
Les autres paramètres tels que le diamètre interne de la colonne, sa longeur sont à voir en fonction des temps d'analyses, des volumes injectés.
Re : Choix d'une colonne HPLC.
Vos réponses se complètent alors un grand merci à tous!!
Je n'ai pour l'instant que quelques connaissances théoriques sur le sujet. J'espère qu'un jour je pourrai passer à la pratique...
En tout cas, c'est très sympa de votre part!
Encore merci et à bientôt.
