Pcr

[invite752e4cdf]

Bonjour,

Le test PCR permet-il de faire la distinction entre les bactéries vivantes et les bactéries mortes?

Merci.
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[gorben]

Salut,

Non la PCR ne permet pas de faire cette difference. Elle permet d'amplifier de l'ADN qu'il soit issus d'une bacterie vivante ou morte.

A+

[invitec9f0f895]

salut

il me semble qu'avec un bon microscope tu fais tout de suite la difference entre des bacteries vivantes et des bacteries mortes non? Pourquoi vouloir utiliser la PCR pour faire cela?

YOyo

[gorben]

Salut,

Je ne suis pas aussi sur que le microscope soit tres recommande pour ca. Soit tu as toutes les cellules mortes et dans ce cas ca se voit (enfin on voit rien, et ca ce voit tres bien aussi a la tete de ton bouillon ) soit tu as un mix de population... alors la il faut avoir l'oeil pour distinguer les debris cellulaires parmis les restes.
Pour distinguer rapidement et de maniere fiable les bacteries vivantes des mortes, il y a un kit tres bien chez promega (pas sur ca se confirme) qui le fait en 2 min pour pas cher.
2 colorants, un qui penetre dans les cellules l'autre pas.
cellules vivantes ---> une seule couleur
cellules mortes (lysee) ---> deux couleurs

A+

PS: apres reflexion, la pcr pourquoi pas si tu traites au prealable ta culture avec de la DNase. Perso je pense que c'est pas la methode a preferer (cher et probablement tres difficile a mettre en oeuvre)

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite76a16e08]

Ben justement, en microscopie, si tu n'as qu'une partie de tes bactéries qui sont mortes, tu peux les compter (avec une coloration comme celle que tu décrit).
Voir ce lien:
http://probes.invitrogen.com/media/g...ow/g000508.jpg

[gorben]

Ouais ok je suis d'accord, m'enfin lire au spec une plaque 96 puits c'est quand meme plus rapide pour avoir le ratio vivante/morte