enzymologie activité spécifique

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énoncé

extrait acellulaire d'Ecoli contient 25mg de protéines/ml . L'incubation à saturation de substrat de 20 microlitre de cet extrait permet la transformation de 1,5 nmoles/min

1)calculer l'activité spécifique et le titre catalytique (nKat) de cet extrait

Aprés avoir purifier l'enzyme on onbient une purification complete de cette enzyme. Km vaut 4.10^(-3) . la masse moléculaire de cette enzyme vaut 58000 daltons.
on mesure l'activité de 1 mg de cette enzyme en présence de 6.10^(-2) moles/L de substrat. La vitesse trouvée est égale à 38,5 10^(-3) nmoles/sec

2) quelle fraction des molécules d'enzyme se trouve sous forme de complexe ES ( j'ai trouvé 95% environ)

3)donnez la valeur de la constante catalytique

j'ai passé mon week-end a comprendre l'équation de michaelis, et je commence a comprendre un peu, mon problème ce sont les exos qui traitent de l'activité spécifique dans des purifications, je ne comprend pas ce qu'est l'activité enzymatique totale(??) et je n'arrive pas a raisonner sur la masse moléculaire pour trouver Kcat( rotation???), je ne me représente pas dans ma tete ce qui se passe concrètement

UI et nkat, quelle difference (que l'unité??)

merci de maider, a plus tard!!!.
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énoncé

extrait acellulaire d'Ecoli contient 25mg de protéines/ml . L'incubation à saturation de substrat de 20 microlitre de cet extrait permet la transformation de 1,5 nmoles/min

1)calculer l'activité spécifique et le titre catalytique (nKat) de cet extrait

Aprés avoir purifier l'enzyme on onbient une purification complete de cette enzyme. Km vaut 4.10^(-3) . la masse moléculaire de cette enzyme vaut 58000 daltons.
on mesure l'activité de 1 mg de cette enzyme en présence de 6.10^(-2) moles/L de substrat. La vitesse trouvée est égale à 38,5 10^(-3) nmoles/sec

2) quelle fraction des molécules d'enzyme se trouve sous forme de complexe ES ( j'ai trouvé 95% environ)

3)donnez la valeur de la constante catalytique

j'ai passé mon week-end a comprendre l'équation de michaelis, et je commence a comprendre un peu, mon problème ce sont les exos qui traitent de l'activité spécifique dans des purifications, je ne comprend pas ce qu'est l'activité enzymatique totale(??) et je n'arrive pas a raisonner sur la masse moléculaire pour trouver Kcat( rotation???), je ne me représente pas dans ma tete ce qui se passe concrètement

UI et nkat, quelle difference (que l'unité??)

merci de maider, a plus tard!!!.

Bonjour,
pour trouver le Kcat, il faut que tu partes de l'équation Vmax = kcat x (Conc° en enzyme).
D'après les données du dessus tu peux facilement déterminer la conc° en enzyme connaissant la masse et la masse moléculaire.
Même si c'a n'est pas écris tel queldans ton énoncé, tu connais aussi la Vmax (compare le Km et la conc° en substrat ).
Tu devrais alors pouvoir déterminer aisément le kcat.
NB: si je peux me permettre, le kcat est une constante catalytique et s'écrit toujours avec un k minuscule. Seule les constante d'équilibre s'écrivent avec un K majuscule.


Concernant les activité enzymatique totales et spécifique, c'est juste une question de volume. Tu mesures une activité spécifique a partir d'un prélevement de 1 ml d'une solution contenant 1 litre. Ton activité spécifique vaudra X et ton activité total 1000 X.


En espérant ne pas avoir dis de bétises car l'enzymologie n'a jamais été mon dada.
Que quelqu'un me corrige et me gronde si j'ai répondu n'importe quoi!

[invitead282ff2]

Pour tes soucis d'unité, tu peux aller voir ce lien.
http://www2.univ-reunion.fr/~dbbm/CY...niteenzyme.htm

C'a devrait répondre à tes questions.

[invitefcf9364b]

est ce que l'activité enzymatique est une Vmax???

d'autre part je n'arrive pas a me servir de la masse moléculaire de l'enzyme , comment lutiliser??

[A voir en vidéo sur Futura]