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Extraction d'ADN



  1. #1
    Wings

    Extraction d'ADN


    ------

    Bonjour,
    Je dois trouver le rôle de chacun des composants d'un tampon de lyse précédant l'extraction d'ADN (extraction phénol - chlorophorme) à partir de cellules animales. Quelqu'un pourrait-il me confirmer ou infirmer les rôles supposés?
    Merci d'avance!
    Wings

    Urée - dénaturant lipidique (membranes) et protéique (nucléases)
    SDS - détergent - solubilisation des lipides
    EDTA - chelateur d'ions bivalents - inhibition de nucléases et dénaturation de structures contenant du calcium
    NaCl - sel - éclatement des compartiments par osmose
    Tris pH8 - ajustement du pH à 8,0 qui permet d’éviter de se retrouver avec un pH acide qui favorise la dégradation de l’ADN
    protéinase K - destruction des protéines (nucléases)

    -----

  2. #2
    jmbowie

    Re : Extraction d'ADN

    Citation Envoyé par Wings Voir le message
    Bonjour,
    Je dois trouver le rôle de chacun des composants d'un tampon de lyse précédant l'extraction d'ADN (extraction phénol - chlorophorme) à partir de cellules animales. Quelqu'un pourrait-il me confirmer ou infirmer les rôles supposés?
    Merci d'avance!
    Wings

    Urée - dénaturant lipidique (membranes) et protéique (nucléases)
    SDS - détergent - solubilisation des lipides
    EDTA - chelateur d'ions bivalents - inhibition de nucléases et dénaturation de structures contenant du calcium
    NaCl - sel - éclatement des compartiments par osmose
    Tris pH8 - ajustement du pH à 8,0 qui permet d’éviter de se retrouver avec un pH acide qui favorise la dégradation de l’ADN
    protéinase K - destruction des protéines (nucléases)
    Cela me semble bien
    Blast up your life!

  3. #3
    Wings

    Re : Extraction d'ADN

    Merci de votre diligence!
    Wings

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