Enzyme
Bonjour,
Voilà je me trouve devant un petit problème donc je fait appel à votre savoir.
J'aimerais savoir si quelqu'un connait une enzyme bactérienne (si possible de E.coli) permettant de cliver les hétéroduplexes ADN/ARN, je dit bien cliver et non dégrader.
Merci beaucoup,
bonne journée
salut
la seule enzyme que je connaisse qui fasse cela est la RNAse H
Yoyo
et bien justement la RNase H degrade le brin d'ARN mais elle ne clive pas l'heteroduplexe... je cherche une enzyme qui coupe ce duplexe en deux molécules double brins
Bonjour,
Je ne pense pas que l'on connaisse une telle enzyme si elle devrait exister.
Si tu ne veux pas utiliser de RNAse H parce qu'elle dégrade, tu peux penser à une chose un peu acrobatique : l'action coordonnée d'UNG et AP-endo. En gros, tu fais intervenir le mécanisme de BER pour corriger les U en T et tu te retrouveras (théoriquement) avec un ADN double-brin à la place d'un hétérodupleix. Puis, tu clives ça là où tu veux avec une enzyme de restriction.
Ou aller voir du côté du phage T5, il y a une histoire super marrante avec un de ses brin clivé à 5 endroits (enzyme nickase, à vérifier).
Je ne sais pas si ce que je dis a un sens pour ce que tu veux faire, vu que tu ne donnes pas trop de détails.
Cordialement,
An expert is one who knows more and more about less and less.
