Bonjour,
J'ai quelques questions à propos du design de sondes (Taqman par exemple) pour faire de la PCR quantitative sur de l'ADN génomique.
J'ai déjà fait de la qPCR, mais en utilisant du Sybr Green. Pour un autre projet, je dois mettre au point une qPCR avec des sondes. J'ai déjà dessiné et validé des primers spécifiques des espèces que je veux amplifier, et je vais donc me mettre prochainement à la qPCR.
- Quelqu'un pourrait-il m'éclairer sur la façon de faire pour dessiner les sondes ? Y'a t-il des logiciels pour faire ça ? Quels paramètres sont importants à prendre en compte, etc...
- Concernant les types de sondes, quels sont les avantages/inconvénients des sondes Taqman par rapport au FRET et vice/versa. Pourquoi choisir l'un plutôt que l'autre ?
- Et enfin, pour faire de la qPCR multiplex, quelles sondes il faut mieux utiliser ?
Merci d'avance !
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