Extraction ADN

[inviteee939144]

Bien le bonjour à toutes et à tous!
Je suis nouveau sur ce forum veuillez m'excuser si je place mal mon sujet ou si ces question ont déjà été posées mais je n'en trouve point de réponse.

Je suis élève en 1ere S et je travaille lors de mes TPE sur l'extraction de l'ADN à partir du sang.
-Après avoir trouvé plusieurs protocoles je cherche le rôle du chlorophorme utilisé avec le phénol(qui lui dénaturise les protéines assaciées à l'ADN).
-De plus j'ai entendu dire qu'il falait utiliser de la protéinase K pour détruire les protéines présentes mais peut-on utiliser la protéinase plutôt que le phénol ou les deux ont-il leur utilité?
-Pour finir l'usage d'un détergent a été mentioné par mon prof de physique mais impossible d'en tirer une information à ce sujet.

Donc voilà merci de prendre la peine de me lire et de m'aider si cela est possible.
Merci d'avance

Vico
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[inviteb8e8d8c3]

Salut, le détergent sert à fractionner les membranes des cellules. Le phénol et le chloroforme servent à séparer l'ADN des protéines qui se retrouvent ainsi dans deux phases différentes. Le phénol a une action inhibitrice sur les enzymes d'une manière générale, ce qui évite la dégradation de l'ADN par les DNases (spécialisées dans la destruction de l'ADN). Mais il est préférable de compléter cette action par des protéinases pour préserver l'ADN au maximum.

[inviteee939144]

Ok merci pour les infos notamment sur les DNases cela va bien m'aider!
En ce qui concerne le détergent sais-tu qu'elle réaction a lieu lors de la destruction de la membrane si c'est bien de cela qu'il s'agit?
Pour les protéinases j'ai trouvé pas mal d'infos de mon côté, mais j'aimerais juste en savoir un peu plus sur les deux phases avec le chlorophorme si possible =)
Encore merci pour cette aide!
Cordialement
Vico

[gorben]

Salut,

Le phenol permet de separer les proteines des acides nucleiques. Le chlorophorme permet de solubiliser les membranes et le phenol pour etre sur que ce dernier ne se retrouve pas dans ton culot final.

Les proteases permettent entre autre de degrader les proteines associees aux acides nucleiques.

A+

[A voir en vidéo sur Futura]

[inviteee939144]

D'accord d'accord merci beaucoup pour ce résumé très efficace! =)
Bonne soirée
Vico