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Enzyme de restriction



  1. #1
    wmnzr

    Enzyme de restriction


    ------

    Bonjour,
    j'ai une petite question dans mon tp qui me pose probleme,je ne trouve pas vraiment comment y repondre,je vais essayer d'etre claire!
    Alors j'ai un plasmide qui fait 5858 paires de base et on nous dit que l'enzyme de restriction EcoR1 coupe a 1,a 948 et a 1582.On me demande de calculer la taille des fragments obtenus apres digestion du plasmide par EcoR1.Je me demande s'il faut soustraire a chaque fois du nombre total de paires de base du plasmide,le nombre de paires de base que coupe EcoR1???Sachant que j'obtiens 3 fragments pour ce plasmide si je ne me trompe pas?!
    j'espere avoir été assez claire!
    merci pour votre aide!

    -----

  2. Publicité
  3. #2
    piwi

    Re : enzyme de restriction

    Bonsoir,

    Ce que je comprends c'est que vous avez deux sites de coupure:
    position 948
    position 1582
    Si ceci est correct (cette partie de votre message n'est pas très claire) alors vous n'allez générer que deux fragments.
    Un fragment de 634pb (fragment entre les deux sites de coupure.)
    Un fragment de 5224 pb (reste du plasmide)

    Cordialement,
    piwi
    Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.

  4. #3
    wmnzr

    Re : Enzyme de restriction

    oui c'est ca,c'est juste qu'il y a un troisieme site de restriction en position 1.Désolée,j'ai pas su etre plus claire!Je pense avoir compris le raisonnement,merci en tt cas!
    une derniere petite question parcontre,on me demande de calculer aussi les fragments attendus dans le cas ou ou il y a plusieurs sites EcoR1 et ou la digestion serait incomplete.Je ne trouve pas cette question tres claire,donc je ne vois pas trop comment faire!

  5. #4
    piwi

    Re : Enzyme de restriction

    Donc vous avez trois fragments:
    948 pb
    634 pb
    4276 pb

    Maintenant la seconde question.
    J'imagine que les "plusieurs sites" de restriction sont les même qu'à la question précédente parce que sinon je vois mal comment déterminer ce que j'attends.
    L'idée est que tous les fragments ne sont pas nécessairement coupés. Par exemple si le site en position 1 n'est pas coupé alors vous aurez la configuration que je décrivais dans mon précédent message.
    Il vous faut reconduire l'idée avec toutes les combinaisons possibles.

    Cordialement,
    piwi
    Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.

  6. A voir en vidéo sur Futura
  7. #5
    wmnzr

    Re : Enzyme de restriction

    daccord j'ai compris le raisonnement,merci bcp en tt cas!je retourne a mon tp!
    a bientot!

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