centrefugeuse et contenu de la fraction

[invite15518c50]

Bonjour
Pour faire le dosage d’une enzyme « la catalase », je prépare le tissu dans un tampon lyse. On me dit qu’il faut centrifuger à 9000 g pour avoir la fraction mitochondriale (contient les mitochondries, les lysosomes et les peroxysomes).
Ensuite :
Pour faire le dosage d’une protéine « Métalothionine», je prépare le tissu dans un tampon lyse. On me dit qu’il faut centrifuger à 30000 g pour avoir la fraction microsomale (contient les rybosomes et les réticulums endoplasmiques).
Ma question est celle-ci :
Est-ce que je déduis que dans la fraction mitocondiale il ya aussi les rybosomes et les réticulums endoplasmiques, et dans la fraction microsomale il ne reste que les rybosomes et les réticulums endoplasmiques) ?
Pour la métallothionine, puisqu’elle se trouve au niveau du cytoplasme pour quoi ne pas tourner simplement en 9000g ?
Pour la catalase, puisqu’elle se trouve au niveau du peroxysome dois-je comprendre que, dans la fraction mytocondiale le peroxysome reste protégée par sa membrane!

Merci beaucoup
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[invitec38e3ca5]

Bonsoir!
Je suis pas vraiment spécialiste du sujet, j'ai fait un peu de biocell sur les organites, et un peu de centrifugation en biophysique.

Alors, à mon avis, si on te fait centrifuger beaucoup plus fort en microsomal, c'est probablement pour éliminer la fraction mitochondriale, histoire d'y voir "plus clair". C'est une méthode de séparation somme toute.
(C'est dommage j'avais vu ce type d'illustration d'une centrifugation par fractions selon les organites dans un gros livre de biologie cellulaire)

Est-ce que je déduis que dans la fraction mitocondiale il ya aussi les rybosomes et les réticulums endoplasmiques, et dans la fraction microsomale il ne reste que les rybosomes et les réticulums endoplasmiques) ?

Je dirais que oui d'une part.
Par contre pour la seconde proposition, juste une question de formulation: je ne m'avancerais pas à dire qu'il ne reste que les ribosomes et les RE, mais je dirais qu'ils restent parmi les éléments qu'on y retrouve.

Pour la métallothionine, puisqu’elle se trouve au niveau du cytoplasme pour quoi ne pas tourner simplement en 9000g ?

Peut être pour épurer, y voir plus clair?

Pour la catalase, puisqu’elle se trouve au niveau du peroxysome dois-je comprendre que, dans la fraction mytocondiale le peroxysome reste protégée par sa membrane!

Peut être que c'est justement à ce moment là que les éléments "explosent", sous l'effet de la centrifugation.


En fait, avec la centrifugation mitochondriale, tu exploses la mitochondrie et le peroxysome, et tu retrouves dans la solution ta catalase.
Et puis après tu "nettoies" la solution, et tu repasse les organites qui ont survécu en centrifugation microsomale, et là tu fais exploser le RE et les ribosomes, avec la Mélathionine.