Etalonnage d'une suspension bactérienne par absorbance

[invitef402121a]

Bonjour,

Voilà je dois faire un étalonnage d'une suspension bactérienne en utilisant l'absorbance (loi de beer lambert). Je sais que je dois diluer ma suspension pour faire une droite étalon en fonction de la concentration mais ce que je ne sais pas c'est comment déterminer la concentration initiale de ma suspension. J'ai fait des recherches sur Internet et il disent tous d'utiliser une technique de dénombrement direct sous microscope (lame de Malassey) mais je n'ai pas le matériel pour ça... Comment puis-je faire ?

Merci d'avance de vos réponses
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[invite53282727]

Bonjour,

D'après moi le plus simple est de faire 2 points pour voir, par exemple non dilué et dilué au 10e.
La courbe est linéaire jusqu'à des absorbances de 0.7 environ.
Une fois que tu as mesuré l'abs sur tes 2 points, tu sais dans quelle partie de la courbe tu te situes et tu peux ensuite affiner ta droite.

Avec la loi de Beer - Lambert : DO = Epsilon x l x C
epsilon : coefficient d'absorption molaire, dépend de ta solution
l : trajet optique 1 cm
Tu as donc DO = fonction de la Concentration et tu obtiens ta concentration initiale.

[invitef402121a]

Je ne pourrais pas utiliser ta méthode puisque le epsilon je ne le connais pas et je ne sais sais pas comment le déterminer, surtout sur une suspension bactérienne...
Mais merci quand même ^^