ARN dégradé apres traitement DNase

[invite93fe98f0]

Bonjour!

Je fais des extraction ARN sur Plasmodium falciparum avec le Kit ### en vue des qRTPCR. Mes genes cibles n'ont pas l'intron donc je suis obligée de faire un traitement DNase (###). Malheureusement apres ce traitement je constate que mes ARNs sont complétement dégradé....

Quelqu'un aurait-il déjà rencontré ce problème??? Merci de votre aide...

Pas de marques sur le forum SVP.

Pour la modération,

LXR
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[Yoyo]

Salut

Mon seul conseil est de changer de DNAse. Il est probable qu'il y ait une RNAse qui traine.

YOyo

[LXR]

Il est probable qu'il y ait une DNAse qui traine.

Une RNase plutôt. Sinon, as-tu essayé de faire l'extraction sans DNase, car la dégradation des ARNs peut aussi provenir d'un souci survenu au cours de l'extraction : contamination ou autres. Le fournisseur de la DNase affiche bien la mention "RNase-free" je suppose?(ce qui ne veut pas dire que ce soit fiable à 100%...)

Greg

[Yoyo]

Une RNase plutôt. Sinon, as-tu essayé de faire l'extraction sans DNase, car la dégradation des ARNs peut aussi provenir d'un souci survenu au cours de l'extraction : contamination ou autres. Le fournisseur de la DNase affiche bien la mention "RNase-free" je suppose?(ce qui ne veut pas dire que ce soit fiable à 100%...)

Greg

Oui biensur aye aye c'est dur la fin de semaine...
yoyo

[A voir en vidéo sur Futura]