bonjour à tous
je vous ai déjà envoyé qqs messages concernant la mise en évidence d'une phosphorylation sur une protéine d'intéret. J'ai pour vous une nouvelle petite question : pensez vous que la phosphorylation soit sensible à la congélation des échantillons. en d'autres termes, puis-je tester un traitement phosphatase après avoir immunoprécipité ma protéine à partir d"un échantillon congelé à -80°C (et ayant donc subit un cycle de congélation/décongélation).
Merci de votre aide
Vav
Bonjour,
Normalement pour l'étude que tu fais, un seul cycle de congélation/décongélation n'affectera pas ton expérience. Le paramètre qui est le plus affecté est la structure de la protéine, donc c'est surtout l'immunoprécipitation qui est concernée (dans le cas où l'anticorps reconnait un épitope conformationnel). La phosphorylation étant une modification covalente, la congélation ne la dérange pas trop.
Greg
merci greg pour cette info
celà m'évite de refaire un extrait cellulaire pour chaque manip
A+
vav
