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RNase A



  1. #1
    SlyRC

    Question RNase A


    ------

    Bonjour, quelqu'un peut-il me donner un protocole détaillé pour faire un traitement de 40µl d'ADN génomique dans du tampon d'élution avec de la RNase A à 10mg/ml (fermentas)? SVP !

    Merci beaucoup!

    -----

  2. #2
    Flyingbike
    Modérateur

    Re : RNase A

    il n'y a pas de protocole tout fait, mais selon la quantité a traiter, il faut entre 10 et 100µg/mL de RNase A pendant 1h @ 37°. Je pense que la RNase n'est pas sensible à l'EDTA.

    Si tu rajoutes par exemple 1µL de RNase A par tube ça devrait le faire...

  3. #3
    SlyRC

    Re : RNase A

    Citation Envoyé par Flyingbike Voir le message
    il n'y a pas de protocole tout fait, mais selon la quantité a traiter, il faut entre 10 et 100µg/mL de RNase A pendant 1h @ 37°. Je pense que la RNase n'est pas sensible à l'EDTA.

    Si tu rajoutes par exemple 1µL de RNase A par tube ça devrait le faire...

    Merci! C'est à peu près ce que je pensais faire... Mais ensuite? Dois je refaire un chloroforme et une précipitation de mon ADN pour éliminer la RNase? Juste une précipitation?

  4. #4
    Flyingbike
    Modérateur

    Re : RNase A

    je dirais que ça dépend de ce que tu comptes faire avec ton ADN ensuite... Précipitation ou phénol/chlo ou meme juste inactivation (je sais pas si c'est possible avec la RNase)

  5. A voir en vidéo sur Futura
  6. #5
    Yoyo

    Re : RNase A

    Salut

    La RNAse A ne s'inactive pas. Le seule moyen de s'en débarasser est un phenol/chloroforme, puis une précipitation.

    YOyo

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