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Dosage protéine



  1. #1
    moulin moulin

    Smile Dosage protéine

    Bonjour,

    Je travaille sur des BL21 GFP et j'extraie les protéines totales par une simple lyse des bactéries dans deux situations : non induites et induites à l'IPTG. Avant de faire migrer sur polyacrylamide, j'aimerais doser mes protéines pour déposer la même quantité dans tous les puits. J'ai un nanodrop, mais la mesure à 280nm est polluer par la présence d'ADN dans mon échantillon. Je pensais faire une coloration des prot avec le kit BCA mais la lecture se fait à 562nm, or la GFP emet à 504nm. Si elle est "colorée" ca change peut-être la donne mais je ne sait pas trop... Quelqu'un a-t-il déjà testé ? Auriez-vous des infos?
    Merci pour vos réponses

    -----


  2. Publicité
  3. #2
    Flyingbike

    Re : dosage protéine

    la gfp n'interferera pas je pense. sinon pourquoi pas un bon vieux bradford ?

  4. #3
    moulin moulin

    Re : dosage protéine

    Oui, j'avais bien pensé au bradford mais j'ai peur que le tampon de lyse contenant du triton et SDS interfère...

  5. #4
    Flyingbike

    Re : dosage protéine

    non, le sds et le triton (ainsi que la plupart des produits qu'on peut trouver dans un tampon d'extraction) n'interferent pas avec le bradford.

  6. #5
    moulin moulin

    Re : dosage protéine

    OK merci, je verrai ca ds la semaine.

  7. A voir en vidéo sur Futura

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