Utilisation de la bromo desoxyuridine

[invitea75feaa5]

Bonsoir,
J'aurai besoin d'une lumiere sur mon cours
''L'uridine est normalement un composant de l'ARN mais sous la forme de bromo desoxyuridine elle ressemble plutôt a la tyhimidine et sera incorporée a sa place. de plus on sait élaborer des anticorps qui se lie spécifiquement avec la bromo desoxyuridine et peut les couple avec des fluorochromes. ''

Mes questions sont ; si j'ai bien compris, on se casse la tête a faire ca parce qu'il n'existe pas d'anticorps spécifique a la thimidine ?

et comment se fait il que cette bromo desoxyuridine va d'incorporer a la place de la thimidine? faut - il s'assurer d'avoir eliminer les thimidines avant l'experience?

merci d'avance
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[piwi]

Bonsoir.

Je réponds à vos questions.
Grosso modo, vous pouvez considérer la thymidine comme une methyl-uridine. La bromodesoxyuridine est globalement une thymidine dans laquelle le groupement méthyl est remplacé par un brome. Il n'empêche que la BrdU et la thymidine se ressemblent. Voilà pourquoi la BrdU est incorporée à la place de la thymidine.

Maintenant pourquoi l'utiliser?
La BrdU est incorporée dans le génome au moment de la phase S du cycle cellulaire. C'est à dire qu'elle n'est incorporée que dans les cellules qui sont engagées dans le cycle. Si vous marquiez directement la thymidine vous marqueriez toutes les cellules sans aucune discrimination.
Le marquage par la BrdU vous sert à deux choses:
1. Dénombrer les cellules dans le cycle.
2. Marquer des cellules et pouvoir voir ce qu'elles sont devenues dans le temps.
Vous injectez la BrdU, vous attendez le temps que vous souhaitez, vous analysez.
exemple: vous injectez la BrdU dans une souris, elle s'intègre dans les spermatogonies au niveau du testicule. Vous regardez 10 jours plus tard, elle se trouve dans les cellules en méiose. Ca vous démontrerait que les cellules en méiose dérivent des spermatogonies.

Cordialement,
piwi

[invitea75feaa5]

merci beaucoup ! c'est tres clair maintenant