Un anticorps marqué par un fluorochrome peut-il se fixer à un acide nucléique?

[inviteb4dda695]

Bonjour à tous,

J'ai une petite question.... est-il possible d'utiliser des anticorps marqués par un fluorochrome pour détecter la présence d'ARN et d'ADN au sein d'une cellule?....

Bien sûr la cellule aura subit quelques modifs au niveau de sa membrane auparavant....

Je débute en bio mol et je me demande si un anticorps n'est pas "trop gros" pour pouvoir se fixer à un acide nucléique.... j'ai entendu parler des puces à ADN mais je ne crois pas qu'il s'agit d'anticorps.....

Merci beaucoup pour vos réponses
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[Flyingbike]

non, de toute façon il y a beaucoup beaucoup plus simple pour marquer l'ADN.

Cependant il existe des anticorps capable de reconnaitre non pas les bases natives mais des analogues comme la bromodeoxyuridine.

[inviteb4dda695]

Merci pour ta réponse Flyingbike,

J'ai du mal à comprendre alors comment cela fonctionne...

On me parle de révélation par fluorescence des acides nucléiques par liaison d'anticorps marqués par un fluorochrome.
Et ces acides nucléiques sont présents dans le cytoplasme ET dans le noyau cellulaire; il n'y a pas de lyse totale de la cellule.

Je suis perplexe.....

[Zellus]

Salut,

Tu as une référence de ce dont tu parles ? Cela dit les anticorps anti-ADN existent bien ...

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite44e598b7]

l'ADN et l'ARN c'est des acides nucléiques donc ils sont plutot marqués par des sondes fabriquées avec des sequences complémentaires à celle qu'on veut regarder.
Les protéines c'est des acides aminés et c'est les proteines qui sont marquées par les anticorps.
J'ai jamais entendu parler d'anticorps anti arn ou adn , si quelqu'un pouvait le confirmer...

[Flyingbike]

apres consultation de spécialistes , il existe en effet des anticorps capables de reconnaitre et de se fixer a l'ADN.

[inviteae6c05c4]

Directement sur l'ADN ou via les histones ?

[Flyingbike]

Apparemment sur l'ADN. Je ne sais pas la technique utilisée pour rendre de l'ADN immunogène...

[invite4d3c78c7]

En gros, les puces à ADN sont des petites lame de verre ou de nylon (comme celle de microscopie habituelle) sur lequel des milliers de fragments d'ADN son disposés de façon géométrique.
Chaque fragment est représenté par un point (ou puce), ils servent de sond epour fixer de façon très spécifique les frag. de gènes complémentaire(cible) présent dans les échantillons biologique a tester.

le contact puce-cible entraine donc l'hybridation de la double hélice d'adn, cela peut être mis en evidence par des techniques optique sous eclairage fluorecent ou par radioactivité. Un systeme de marquage via des traceurs fluorescent ayant été realisé prealablement.

Un ordinateur analyse ces donnés et les traduits.
En gros on obtient une plaque parcememé de milier depoint rouge, jaune ou vert