Bonjour,
j'aimerais comprendre a quoi sert une PCR?? je sais que c'est pour repliquer une sequence d'ADN autant de fois qu'on veut, l'amplifier... mais ca sert a quoi? ici par exemple pour la CHIP, comment on peut retrouver une sequence specifique en amplifiant l'ADN?? je suis tres confuse... je vois vraiment pas le but...egalement dans une mutagenese dirigée...a quoi exactement ca sert d'amplifier un gene apart pour l'avoir en plusieurs copies??
Merci d'avance,
Cordialement.
La réponse est toute simple..
On ne peut pas travailler sur une seule molécule d'ADN! C'est seulement un problème de limite de nos techniques actuelles..
Dans un tube, tu n'as jamais une seule séquence d'ADN, une seule enzyme....Tu en as toujours plein !!!!!!!!
Par exemple à la suite d'une CHIP :
Tu immunoprécipites une protéine. Celle-ci est accrochée à un fragment d'ADN. Du coup tu récupères ce dernier. Mais ta machine de séquençage sera bien incapable de séquencer une seul brin d'ADN. Il faut d'abord que tu l'amplifies !! Ainsi tu auras des centaines de copies et la machine sera capable de faire le séquençage !!!
C'est pareil pour la transgénèse :tu ne peux pas travailler avec une seule molécule, il t'en faut des milliers pour que ça marche !!!!
en fait tu es souvent obligée d'amplifier l'ADN pour plusieurs raisons :
pour quantifier l'expression d'un gene donné ou détecter sa présence (car indétectable sans amplification), pour faire des mutations puisqu'il faut modifier une ou plusieurs bases ce qui n'est pas possible sans élongation, pour le séquencer.... C'est tellement vaste, n'hesite pas si tu veux des précisions.
