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reactifs utilisés pour l'éxtraction de l'ADN et la PCR




  1. #1
    sonika

    Exclamation reactifs utilisés pour l'éxtraction de l'ADN et la PCR

    bonjour
    je ne trouve pas le rôle du TE (tris EDTA ) lors de l’extraction de l’ADN génomique de Arabidopsis,
    Dans mon protocole on parle aussi de speed-vac comment ça marche et à quoi ça sert

    Autre question : on sait que la PCR se déroule en trois temps
    dénaturation , hybridation et élongation
    les trois phases correspondent à un cycle ,
    mais à quoi correspond les étapes 1 et 4 (en gras), et pourquoi ça dure plus longtemps que les autres ?c’est part rapport au fonctionnement du thermocycleur

    94°C 5min
    94°C 1min
    55°C 1min 30cycles
    72°C 1min

    72°C 7minmerci de m'éclairer

    -----


  2. Publicité
  3. #2
    piwi

    Re : reactifs utilisés pour l'éxtraction de l'ADN et la PCR

    Le TE c'est du Tampon d'Elution. Une solution saline isotonique qui sert à rediluer et conserver vos ADN une fois que vous les avez extraits. Il est souvent simplement remplacé par de l'eau.

    Le Speed Vac est une sorte de centrifugeuse sous vide qui permet d'évaporer rapidement un solvant et de déshydrater ce qui s'y trouve.

    Cordialement,
    piwi
    Je sers la science et c'est ma joie.... Il parait.

  4. #3
    Flyingbike

    Re : reactifs utilisés pour l'éxtraction de l'ADN et la PCR

    Alors pour les 94° pendant 5 minutes ça a deux fonctions : bien dénaturer tout l'ADN, et activer la Taq polymérase qui est rendue inactive artificiellement. Ca permet qu'elle commence a etre active uniquement au début du programme.
    L'élongation finale a 72° permet de laisser a la Taq le temps de finir tous les produits d'élongation incomplets.


  5. #4
    sonika

    Smile Re : reactifs utilisés pour l'éxtraction de l'ADN et la PCR

    mes remerciements les plus sincères

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