bonjour,
J'ai une question concernant la technologie 454 (séquençage). Il y a des choses qui m'échappent.Comment les microbilles peuvent-il fixer un ADN à la fois?
les étapes:
1/ on amplifie une banque d'ADN sb avec 2 adaptateurs:
on fragmente l'ADN db
on fixe les adaptateurs aux extrémités
on isole ces fragments (donc on a des fragments sb avec les adaptateurs)
2/ on amplifie l'ADN sb
on a des microbilles qui contiennent à leur surface des amorces complémentaires de l'adaptateur.
Pour UNE microbille donné on a hybridation d'UN ADN sb. Puis on effectue une amplification par PCR (l'ADN sb amplifié va se fixer sur une autre amorce de la microbille et ainsi de suite...) et donc au final pour UNE microbille donnée on a le même fragment d'ADN sb qui sont fixées sur toutes amorces? C'est bien ça?
Pour une microbille, on a le même fragment?
Sur chaque microbille on a un type d'ADN sb donné????
3/séquençage
chaque microbille est déposé dans une plaque puis le séquençage se fait selon le pyroséquençage
Merci par avance
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