Epissage

[invite814236bd]

Bonjour,

Quelle experience permet de mettre en evidence un epissage d ARN?

Merci
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[invite8bb58809]

Salut ,
Je suis pas très bien informé dans le domaine mais je pense que à partir du moment où l'on connait la séquence nucléotidique d'un gène et la séquence en acides aminés de sa protéine,ça ne pose pas de problème ! En effet à partir du moment où tu connais la séquence d'un gène tu peux en déduire la séquence de l'ARN messager immature correspondant (par complémentarité). Or, si tu connais le polypeptide correspondant à ce gène (supposons une protéine entière pour se faciliter la vie), tu remarques que si tu essayes de retrouver la séquence de l'ARN messager mature à partir de sa séquence en acides aminés, tu trouveras un ARN mature différent (plus court) que l'ARN messager immature dont on avait parlé plus haut ! Il existe donc un mécanisme d'excission et de recollage de l'ARN messager immature : l'épissage. Donc pour résumer ton expérience : repérer un gène, le décoder, faire en sorte qu'il soit surexprimé spécifiquement (pour pouvoir trouver sa protéine correspondante) et le reste en découle!.

[invite71f23525]

L'hybridation de l'ARNm avec l'ADN génomique correspondant suivi de l'action d'exonucléase permet d'obtenir les fragments d'ADN génomique correspondant aux exons. Si l'ADN génomique reste entier après digestion, c'est que l'ARNm n'est pas épissé.

Greg

[invite7825c20b]

Salut

Le northern c'est pas mal non plus.En plus on visualise bien les deux bandes sur le gel correspondant aux formes non épissées et matures. A condition d'avoir pris une sonde exonique.

[A voir en vidéo sur Futura]