Bonjour, je viens d'avoir un cours sur la PCR, mais je n'ai pas compris grand chose. Je me suis vraiment accroché pendant 1h30, sur toute la partie au sujet des Southern blot, Northern blot, Western blot, mais au moment de passer au PCR, j'ai décroché une vingtaine de secondes et j'me suis retrouvé complètement paumé, à prendre des notes que je ne comprenais pas.
Je sais que c'est un moyen de multiplication ( amplification ) d'une séquence d'ADN ou d'ARN.
Je sais que ça fonctionne par cycles, et que ces cycles sont conditionnés par des variations de température.
Mais après plus rien, et sur le net je ne trouve pas mon bonheur ...
On a parlé de :
Duplication de séquence encadrée par des couples d'amorces ...
Couples d'amorces ( amorce sens, amorce anti-sens, oligo-nucléotides ... )
Séquences oligoDT ( ? ) correspondant à de l'ADN synthétique simple brin ...
Séquence anti-sens ...
Thermocycleur ...
ARN polymérase thermostable chez archéobactérie ( apparemment c'est ça qui rend la PCR pratiquable, sans quoi il faudrait remplacer à chaque cycle l'ARN polymérase "usée" et dénaturée par la chaleur ) ...
Abaisser la température pour permettre une renaturation ...
ADN mise en excès favorisant une hybridation des amorces sur leu cible ...
Extension des amorces ...
Quelqu'un pourrait-il m'aider ? J'aurai surtout besoin des infos de base ( qu'est ce que ça permet d'amplifier, les différentes étapes, des petites explications des notions clés un peu plus haut ... ).
Un grand merci d'avance, ça me lèverait un gros poids![]()
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