Compter le nombe de plaquette & globules

[invite8a7e1f83]

Bonjour,

Comment les labos comptent t-il le nombre de plaquettes et de globules rouges et blancs que l'on a dans notre sang ?

C'est certainement des machines mais comment les machines font-elles ?

Merci
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[invite75e918c6]

Alors ça dépend complètement de l'automate utilisé, souvent ils utilisent des cytomètre de flux (je te met le principe sous forme de shcéma) où le principe est assez simple c'est que chaque cellule de la suspension cellulaire va passer dans un conduit très serré où un rayon laser va taper sur la cellule et selon l'angle de déviation et la densité de celle-ci, et bien la machine va reconnaitre de quel cellule il s'agit.
Schéma :
http://www.ifr87.cnrs-gif.fr/pbc/ima.../cytometre.jpg

Ensuite, il y a un traitement informatique qui est réalisé par la même machine et là, c'est pareil, soit on a une feuille de résultat soit on a un graphique selon l'automate utilisé (à l'IUT j'ai eu droit à une feuille de résultat mais je crois que ce n'était pas un cytomètre de flux que j'ai utilisé mais un appareil qui utilise le même principe)
On obtient ce genre de graphe
http://cytobase.montp.inserm.fr/Imag.../diffusion.jpg

Seul soucis de la technique est que ça coute bien cher et que toutes particules viables on non sont comptées et que des particules de même taille qu'une cellule peuvent être comptée comme une cellule ;-D


Si tu veux d'avantage de détail sur cette technique, je t'incite à regarder ce lien ;-D
http://cytobase.montp.inserm.fr/Cours/Cours.html

[Edelweiss68]

Bonjour,

Et puis quand on a des résultats douteux ou une anomalie, on contrôle la formule en faisant un frottis observé après coloration sous le microscope.

[invite64fbe576]

Juste une précision.
La méthode de référence pour ces numérations reste la "variation d'impédance", où chaque cellule passant à travers un orifice va modifier le courant électrique en fonction de sa taille.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite8a7e1f83]

Juste une précision.
La méthode de référence pour ces numérations reste la "variation d'impédance", où chaque cellule passant à travers un orifice va modifier le courant électrique en fonction de sa taille.

AAAh ça m'intéresse déjà plus car le laser c'est irréalisable...

Si j'ai bien compris chaque cellule à une impédance qui lui est lié en fonction de sa grosseur etc et donc à chaque fois que une cellule passe le courant est modifié ?

Mais comment réaliser un tuyau d'un si petit diamètre ???

[invitec45abc54]

AAAh ça m'intéresse déjà plus car le laser c'est irréalisable...

Si j'ai bien compris chaque cellule à une impédance qui lui est lié en fonction de sa grosseur etc et donc à chaque fois que une cellule passe le courant est modifié ?

Mais comment réaliser un tuyau d'un si petit diamètre ???

Le "tuyau" n'est pas physique...
Chez Beckman, leurs cytomètres utilisent un "liquide de gaine" qui circule dans le sens inverse du passage des cellules dans la cellule photosensible (flow-cell)... En fonction de la quantité du liquide de gaine, tu fais varier le diamètre de passage et donc le nombre d'évènements comptés par le cytomètre.
Je ne sais pas si c'est clair, voici un schéma fait à l'arrache...:
http://dl.dropbox.com/u/3271930/sheme.htm

Le cytomètre analyse la lumière transmise (je ne suis pas spé dans l'optique), et définit pour chaque evènement la taille et la structure (hétérogénéïté). Il présente le résultat sous forme d'un graph 2D taille=f(structure) et permet de "sélectionner" chaque évènement en fonction de sa taille-structure. Par exemple : http://www.unilim.fr/theses/2005/san...s/image016.png
Si tu fais passer une solution de billes calibrées en nombre, ça te permet de compter les évènements et donc de dénombrer les cellules de ton échantillon. Mais il n'est pas recommandé de faire passer du sang total dans un cytomètre (trop d'evenements), tu sépare les différents types de cellules avant.

lyse des rouges pour abservation des lympho-mono-neutro
PRP pour les plaquettes


Bonne journée

[invite8a7e1f83]

ok j'ai compris. Une chose est sur c'est qu'on ne peux pas le faire "maison" ! c'est relativement complexe

[invite64fbe576]

Pour essayer de ne pas t'embrouiller :

Keamro te parle dans ses posts du principe de cytométrie en flux. Cette technique nécessite, comme tu le rappelles, un laser (+/- fluorochromes). C'est une technique un peu plus récente en hématologie et qui grosso-modo est utilisée pour les formules leucocytaires.

Par contre, dans mon post je te parle d'une technique plus ancienne dite de référence, la variation d'impédance qui elle ne nécessite pas de laser. Il y a bien un orifice par lequel passent les cellules. Cette technique, grosso modo, est utilisée pour les numérations des plaquettes, glob blancs, glob rouges.


Donc, 2 choses bien différentes. Et qui ne sont pas réalisables "maison".