Fixation au Zinc

[inviteae6c05c4]

Bonjour,

Je m'intéresse à la fixation des cellules par le zinc. Auriez-vous des retours/une expérience sur ce type de fixation ?

Merci.
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[inviteae6c05c4]

'jamais de succès avec mes questions ...

Et une idée du mécanisme moléculaire de la fixation par le zinc, pour ma culture G ?

[invite71f23525]

Pour le mécanisme, j'ai une petite idée.

Les cations divalents (surtout Ca2+ pour les liaisons des cadhérines) sont très importants pour l'adhérence des cellules à un support. La preuve c'est qu'une incubation de cellules adhérentes pendant une dizaine de minutes avec de l'EDTA suffit à les décrocher.

Je suppose que le zinc fait un peu la même chose, maintenant, pourquoi lui et pas Ca2+ par exemple, je ne sais pas. Pour le mécanisme, je suppose qu'une charge positive va interagir avec les polysaccharides de surface de la cellules (ces polysaccharides servent beaucoup à la transfection des cellules : les agents de transfection sont toujours cationiques...), l'autre charge positive pas interagir avec les groupements sianols (silice + fonction alcool) à la surface de la lame de verre.

Voilà mon hypothèse, à prendre ou à laisser.

[invite22543775]

salut, j'ai une question; quel type de fixation tu as demandé? fixation des cellules sur un Bio-support à la présence de zinc ou l'adjonction entre ces cellules à la présence de zinc.

Voila merci LXR je pense que cette hypothèse raisonnable.

[A voir en vidéo sur Futura]

[inviteae6c05c4]

salut, j'ai une question; quel type de fixation tu as demandé? fixation des cellules sur un Bio-support à la présence de zinc ou l'adjonction entre ces cellules à la présence de zinc.

Voila merci LXR je pense que cette hypothèse raisonnable.

Bonsoir,

Euuuuh, je n'ai pas bien compris le sens de votre question (ou HEIN ?). Je n'ai pas été suffisamment clair. En fait, comme beaucoup de monde, je fixe habituellement mes cultures cellulaires au PAF 4% pour réaliser ensuite des ICC (au passage, je cultive sur du plastique). Mais, j'ai lu récemment plusieurs papiers vantant les bienfaits de la fixation par le zinc. Cette technique aurait pour avantages de conserver la morphologie, tout comme les fixateurs de type "formalin", de garder intact les acides nucléiques (PCR possible derrière), ce qui n'est pas possible ou alors très hasardeux avec le PAF et sa famille, et enfin, il semblerait que cette méthode de fixation conserve un plus grand nombre d'épitopes à l'état "natifs".

C'est une technique qui me conviendrait puisque j'envisage de réaliser des ICC sur un petit nombre de cellules pour mettre en évidence des marqueurs d'immaturité. Visiblement, il n'y a que des avantages, et pourtant ce n'est pas vraiment répandue comme technique. D'où ma question initiale (il est où le problème ???). Il doit bien y avoir quelques points noirs quand même...

Merci à vous deux, en tout cas, pour votre intervention.

[invite71f23525]

Désolé je n'ai pris ta question que dans le sens de la fixation des cellules sur un support et non à leur fixation telle qu'on l'entend habituellement (figer les cellules)... Je n'ai aucune hypothèse pour ce cas.