Préparation tampon phosphate

[invite693e8883]

Bonjour,

J'aurais voulu savoir comment fait t-on pour préparer le tampon phosphate à 50mM pH 7,4?

en utilisant du:
Phosphate de sodium dibasique (Na2HPO4), PM=141,96g/mole
Phosphate de potassium monobasique (KH2PO4), PM=136,086g/mole

Merci
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[invite263cfbe5]

Bonjour,

C'est pour faire quoi ton PBS ?

[invite693e8883]

et bien c'est pour la mesure de l'activité enzymatique

[invite02e16773]

Etapes pour faire un tampon :

1. Savoir ce que l'on veut : dans ton cas un tampon à 50mM de chacun des réactifs (si j'ai bien compris...).
Mais quel volume ?!

2. Calcul de la masse de réactifs à peser

3. Dilution des réactifs dans une petite quantité de solvant.

4. Mesure du pH et ajustement du pH s'il n'est pas ok. Pour ajuster, il faut ajouter un acide (ou une base) ne contenant QUE les espèces en solution.
Dans ton cas, il s'agira d'acide phosphorique ou de soude.

5. Compléter avec le solvant jusqu'au volume désiré.

Supposons que tu veuilles 500mL d'un tampon à 50mM des réactifs que tu as indiqué.
1 mol de NaHPO4 pèse 141,96g.
50.10^-3 mol pèsent x grammes
=> règle de trois : x = 141,96 * 50.10^-3 = 7,1g
Donc il te faut 7,1 g de Na2HPO4 par litre de solution ; donc 3,55g pour 500mL.
Même raisonnement avec KH2PO4.

Et après tu suis les étapes ...

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite693e8883]

ok, j'ai compri
mais je veux savoire si la concentration du tampon phosphate finale est de 50mM et comment je met un pH 7,4

[invite693e8883]

de l'aide S.V.P