extraction d'ADN et protéines

[invite96b398e5]

bonjours tous le monde!
S'il vous plait ,si vous pouvez m'aider , j'ai besoin d'un protocole pour effectuer une extraction d'ADN et des poteines à partir des poissons ,pour un travail de fin d'études.
merci d'avance pour votre collaboration
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[Edelweiss68]

Bonjour,

Quel poisson, quelles protéines...? Un peu plus de détails!

[invite96b398e5]

rebonjours
je veux travailler sur plusieurs espèces de poisson pour étudier l'empinte protéique et génétique chez eux; je vais travailler sur les protéines totaux.(éspèces d'eau de mer)

[invite3c235e37]

Bonjour,

Il y a pas mal de kit qui proposent des extractions d'ADN génomique à partir de tissus, il y a aussi la méthode phénol-chloroforme mais il faudra que tu lyse tes tissus avant... jette un coup d'oeil sur le site Current Protocols in Cell Biology (http://cda.currentprotocols.com/Wile...471241083.html). Tu devrais trouver plusieurs protocoles...

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite853321bf]

Si tu veux extraire les deux en même temps, tu peux faire une extraction au phénol / chloroforme- alcool isoamylique. Tes acides nucléiques seront dans la phase aqueuse, et tes protéines dans la phase solvant.
Avantage = des rapports d'extraction inégalés par aucun kit.
Inconvénient = un temps de manip 10 fois plus long qu'aucun kit.