[Biochimie] Méthode de détermination de Kd avec une colonne de chromatographie.
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Méthode de détermination de Kd avec une colonne de chromatographie.



  1. #1
    invite8f0c515e

    Méthode de détermination de Kd avec une colonne de chromatographie.


    ------

    Bonjour, j'aimerais calculer une constante d'association ou dissociation entre deux protéines.
    Les deux sont soit avec his tag, soit sans rien.
    En plus de ça, l'un des deux partenaires est fusionné à la GFP superfolder.


    Qualitativement je vois comment faire (immobilisation de l'un avec le his tag, et on regarde sur la fluorescence de l'autre reste sur la colonne ou pas), mais est ce qu'il est possible d'obtenir une valeur de Kd proprement (je sais pas genre en prenant la concentration en sel en compte...)

    J'ai une colonne his tag et des colonnes échangeuses d'ions. J'aimerais pouvoir avoir des résultats dans les 3 semaines, avant de partir pour le jamboree d'iGEM !

    Merci de votre aide =)

    Renaud

    -----

  2. #2
    invite8f0c515e

    Re : Méthode de détermination de Kd avec une colonne de chromatographie.

    Personne? En gros je veux faire un GST-pull down mais avec un his tag. Est ce qu'on peut avoir une valeur de Kd à la fin?

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