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calcul de l'activité catalytique d'une enzyme



  1. #1
    mounamoon

    Question calcul de l'activité catalytique d'une enzyme


    ------

    Bonsoir
    J'ai un exercice en Enzymo que j'arrive pas à resoudre

    il concerne l'activité de la glutamate deshydrogenase qui est mésurée ds le sens de la formation du glutamate

    ds la cuve où l=1cm à T=25c on introduit
    sulfate d'ammonium 0.2 ml
    solution tampon pH8 2.4 ml
    solution de NADH 0.1 ml
    solution d'extrait d'enzyme purifiée 0.1 ml
    solution de 2 oxaloacetate 0.2 ml

    on mélange et mesure l absorbance et on nous donne un tableau Absorbance en fonction du temps
    (la courbe est decroissante à devenir constante dès t=7min où A=1.430 )

    1)on demande de déterminer la concentration d'activité catalytique d'Enzyme en Kat/ml

    2)calcul de l"activité specifique de E en UI/ml sachant que l'extrait d'E contient 10 mg de proteine/ml

    3)calcul de l'activité molaire spécifique de E sachant que PM=560000g/mol

    en effet ,pour 1 je pense qu'on va utiliser la lois de Beer lamber A=l.C.e (où e est le coeff de dissociation ) si ce qui est demandé est la concentration selon ma comprehenssion

    mais je ne sais pas comment ,est ce que je dois fair ela somme des C de substrat et produit mmmm je sais pas ,et surtout que l Absorbance est mesurée en fct du temps ;va t on trouver la fct de la courbe mm
    je suis totalemnt perturbée ^^'

    pour la 2,je pense qu'à partir de l'activité trouvée en 1 ,on doit la transformer en UI en la multipliant par 16.67 car UI=16.67 nKat
    puis on divise sur les 10 mg

    pour 3 ,je crois qu'on va multiolier cette activité trouvée en 2 par le PM , par quelle loqique? je ne sais pas

    je suis débutante en enzymo ,et j'aimerai bien avoir de l'aide pour résoudre ce type d'exercices .
    Si vous en avez ,je serai très reconnnaissante si vous me les suggerer

    Merci infiniment

    -----

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  4. #2
    mounamoon

    Re : calcul de l'activité catalytique d'une enzyme

    remarque : désolée e c le coeff d'extinction

  5. #3
    mounamoon

    Re : calcul de l'activité catalytique d'une enzyme

    svp j'attends encore vos réponses

  6. #4
    LXR

    Re : calcul de l'activité catalytique d'une enzyme

    Un peu de patience stp, l'heure est tardive, nous sommes en plein milieu de semaine, et ton sujet n'est pas le seul sur le forum.

    Les exercices se postent dans la rubrique "exercices en biologie". Discussion déplacée.

    LXR pour la modération

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #5
    mounamoon

    Re : calcul de l'activité catalytique d'une enzyme

    Oui vous avez raison ,merci bien ^^

  9. #6
    mounamoon

    Re : calcul de l'activité catalytique d'une enzyme

    Bonjour ,je suis encore bloquée ,si vous pouvez me donnez un coup de main

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  11. #7
    LXR

    Re : calcul de l'activité catalytique d'une enzyme

    1) On te demande de calculer une kcat/ml, ce qui implique de calculer tout d'abord de calculer la kcat. Tu as une droite A=f(t). Grâce à l'epsilon, à partir de la valeur d'absorbance d'un point sur la droite, tu peux en déduire la concentration correspondante. Sur cette droite, kcat correspond au coefficient directeur de la droite. Il suffit donc de reprendre ses formules mathématiques en prenant en ordonnées deux valeurs de concentration (donc tu auras préalablement converti les absorbances en concentration), et en abscisse les deux temps correspondants. Je te laisse faire le reste, ça devrait être facile désormais...

    2) Ton raisonnement est correct.

    3) Comme formule générale, on sait que des molaires (masse ou concentration) sont obtenus en divisant une masse ou une concentration massique par la masse molaire ou poids moléculaire. Je te laisse deviner la suite.

  12. #8
    Edelweiss68

    Re : calcul de l'activité catalytique d'une enzyme

    Citation Envoyé par mounamoon Voir le message
    pour la 2,je pense qu'à partir de l'activité trouvée en 1 ,on doit la transformer en UI en la multipliant par 16.67 car UI=16.67 nKat
    puis on divise sur les 10 mg
    Euh moi pour ton 2, je ne suis pas d'accord. Si 1 UI = 16.67nkat alors si tu disposes d'une valeur en nkat, c'est une division qu'il faut faire pour tomber sur des UI.

  13. #9
    LXR

    Re : calcul de l'activité catalytique d'une enzyme

    En effet, pour ce genre de formule, c'est l'inverse d'une équation ce qui a tendance à piéger par "habitude". Autant pour moi.

  14. #10
    Edelweiss68

    Re : calcul de l'activité catalytique d'une enzyme

    Citation Envoyé par LXR Voir le message
    Autant pour moi.
    Au temps pour moi

  15. #11
    mounamoon

    Re : calcul de l'activité catalytique d'une enzyme

    Merci bien ,j'ai resolu merciiiiiiiiiiiiiiiiiiii
    vous etes les meilleurs

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