Fragment de Klenow et activité exonucléasique 5'->3'

[invite25f2daf6]

Bonjour à tous !

Il y a un point de mon cours que je n'ai pas bien compris et après plusieurs recherches sur le net, ça ne m'est pas vraiment plus clair alors je m'adresse à vous en espérant avoir quelques réponses

D'après ce que j'ai cru comprendre (corrigez moi si je me trompe), l'activité exonucléasique 5'->3' a différents rôles/effets lors de la réplication:
- elle dégrade les amorces ARN
- elle élimine le groupement phosphate en 5'
- elle intervient lors d'une cassure d'un brin de l'ADN en l'hydrolysant depuis l'extrêmité 5'

Mais je ne comprends toujours pas pourquoi il est utile que le fragment de Klenow ne possède pas cette activité exonucléasique 5'->3' ? Qu'est-ce que cela provoquerait si ce n'était pas le cas ?


Merci pour vos réponses !
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[Edelweiss68]

Bonjour,

Il est surtout utile que le fragment de Klenow ait une activité exonucléasique 3'-> 5' à visée corrective.

[invite25f2daf6]

Oui, je comprends l'utilité de l'activité exonucléasique 3'->5' mais pas celle de l'absence de l'activité 5'->3'.

[Edelweiss68]

Moi non plus.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite93be52ba]

Bonjour,

In vitro, il est utile d'utiliser uniquement le fragment de klenow et non pas la DNA pol I dans sa globalité. En effet, de cette manière, on perd l'activité exonucléase 5' -> 3'. On peu donc par exemple procédé à la synthèse d'ADN db à partir d'un matrice ADN sb sans craindre que celle ci soit dégradée par exemple.

est ce clair?

poleko

[invite25f2daf6]

oui c'est clair !

merci beaucoup pour votre réponse