inverse PCR

[invite98ebaf43]

bonsoir

quelle est le principe de l'inverse PCR ?
-----

[Edelweiss68]

Bonsoir,

On l'appelle aussi RT-PCR : http://forums.futura-sciences.com/bi...53-rt-pcr.html

[invite64ac1e0b]

Bonjour,

La RT-PCR est une technique utilisant la reverse transcriptase qui est une enzyme provenant des rétrovirus. Cette enzyme permet de transformer l'ARN en ADNcomplémentaire. La RT-PCR est donc une technique de PCR classique sur un ADNc obtenu à partir d'un ARNm.

Cordialement,

Kiwieslearning

[invite68e72638]

Attention à ne pas confondre avec la RT-PCR qui veux dire "Real Time PCR"

le PCR temps réelle est une technique qui permet d'intégrer un "dosage" et donc un aspect quantitatif au processus d'amplification.

[A voir en vidéo sur Futura]

[Edelweiss68]

Bon, me revoilà. Il semblerait que tout ne soit pas si limpide que cela.

Ici : http://books.google.fr/books?id=G0A_...rse%22&f=false

Ils nous disent que la PCR inverse ne serait pas la même chose que la Reverse Transcriptase PCR comme l'entendent certains auteurs (http://www.ens-lyon.fr/RELIE/PCR/res...cr/rtpcr01.htm).

Donc prudence !

[invited4d08314]

Bonsoir Edelweiss68,
euuh ... voilà après avoir consulté ton second lien, j'ai trouvais qu il n y avait pas de différence entre une RT-PCR et une PCR inverse :s

a moins que j ai très mal compris ce que j ai lu

[Edelweiss68]

Bonsoir Edelweiss68,
euuh ... voilà après avoir consulté ton second lien, j'ai trouvais qu il n y avait pas de différence entre une RT-PCR et une PCR inverse :s

a moins que j ai très mal compris ce que j ai lu

C'est justement cela que je soulignais. Dans le premier lien, il s'agit d'une PCR différente de la RT-PCR alors que dans le second lien ils disent que c'est la même chose.

[invite98ebaf43]

bonsoir

je sais qu'il existe une différence entre l'inverse PCR et RT PCR, mais le problème c'est que j'ai pas bien compré le principe de l'inverse PCR et quelle est l'interet des plasmides dans cette technique?????..

[invite98ebaf43]

[invite64ac1e0b]

L'inverse PCR est utilisée pour amplifier l'ADN avec une seule séquence connue... Et oui car pour une PCR classique tu as besoin de 2 amorces!

Du coup, on peut l'utiliser pour déterminer des localisations d'insert, amplifier une séquence ADN dont une partie est inconnue.

Et on utilise pas de plasmide... Ce que tu peux confondre avec un plasmide n'est qu'une séquence d'ADN génomique qui s'est refermée sur elle-même... (une des étapes de l'inverse PCR)

J'ai joint un fichier made in wiki... C'est un schéma qui reprend bien l'inverse PCR L'explication n'existe pas en français mais en anglais... Be brave!

[invite64ac1e0b]

Ah et je me permets de préciser la chose suivante: RT-PCR et inverse PCR n'ont rien à voir...

RT-PCR: technique qui utilise la RetroTranscriptase pour former de l'ADNc à partir d'un fragment d'ARN puis PCR classique

Inverse PCR: technique qui utilise des enzymes de restriction et des ligases afin de pouvoir réaliser une PCR sur un fragment d'ADN dont la séquence est en grande partie inconnue.

et Real-time PCR c'est encore autre chose... C'est une technique de quantification que l'on peut réaliser pour mesurer l'amplification de l'ADN... Cette technique peut être utilisée sur la plupart des PCR..

J'espère avoir répondu à tes questions...

Respectueusement,

kiwieslearning

[invite98ebaf43]

bonsoir

et merci bien kiwieslearning