Présentation PCR en temps réel

[invite5d27294a]

Bonjour,
Je dois faire une présentation sur la PCR en temps réel concernant le principe,les fameux calculs qui donnent mal au crane,les appareils utilisés et leurs modes de fonctionnement,etc...
Auriez-vous une idée?
Merci bien
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[kamor]

Faire une recherche sur le net. Beaucoup de sites très bien fait expliquent de façon très pédagogique cette technique.
Après, présentation classique,
- historique
- description des différentes techniques de Real Time PCR (bien différencier Real Time de qPCR, tiens, j'en ai marre que les gens confondent ) c'est à dire avec ou sans sondes, les types de sondes utilisées, etc.
- utilisation.

Les appareils, ils commencent quand même à y en avoir beaucoup de différents constructeurs et de différents modèles. J'y vois pas trop d'intérêt.

[invite5d27294a]

Merci Kamor,je me baserais sur le déroulement que tu m'as indiqué,ça devrait m'aider à rester structuré et je ferai attention à bien différentier (bien vu de ta part) la reel time syber green et la QPCR sondes taqman et autres FRET (bien spécifique) ,c'est bien ça?
Merci bien

[Edelweiss68]

je ferai attention à bien différentier (bien vu de ta part) la reel time syber green et la QPCR sondes taqman et autres FRET (bien spécifique) ,c'est bien ça?

En fait, vous avez :

- les molécules intercalantes type SYBRgreen® par exemple
- les sondes fluorescentes type Taqman® (sonde d'hydrolyse), FRET...etc

[A voir en vidéo sur Futura]

[kamor]

et je ferai attention à bien différentier (bien vu de ta part) la reel time syber green et la QPCR sondes taqman et autres FRET (bien spécifique) ,c'est bien ça?
Merci bien

Ah oui mais là ça part déjà mal, on peut du quantitatif avec du Sybr et de la simple Real Time PCR avec des sondes.
La quantitative permet de quantifier (d'où son nom) l'ADN dans ton échantillon alors que la Real Time ne s'intéresse qu'au côté qualitatif, donc savoir si un amplicon est formé. On peut aussi avoir certaines infos sur cette amplicon

[invite5d27294a]

Merci de me corriger,c'est vrai que là je me perds encore!!! en fait d'abord je parle de la reel time au niveau du principe qui montre le côté qualitatif qulque soit la methode(intercalant ou sonde) et ensuite la quantification relative et absolue?
Merci encore de m'orienter

[kamor]

Merci de me corriger,c'est vrai que là je me perds encore!!! en fait d'abord je parle de la reel time au niveau du principe qui montre le côté qualitatif qulque soit la methode(intercalant ou sonde) et ensuite la quantification relative et absolue?
Merci encore de m'orienter

Je te conseillerai de faire une recherche sur le net. Je pourrais t'indiquer un site, mais la recherche d'informations est l'une des bases de travail scientifique et Internet est un outil qu'il faut apprendre à fouiller. Et faut l'avouer, les moteurs de recherche se sont grandement améliorés pour simplifier cette tâche.
Apprendre maintenant cette tâche, c'est pouvoir l'utiliser tout le temps plus tard