kit qiagen
Bonjour,
on va peut être me crier dessus mais voilà j'ai un souci j'ai fait un tp où l'on utilise le "plasmid Mini kit (100)" de QIAGEN pour une extraction plasmidique et je cherche à savoir de quoi est composé ce kit!!
Quand je vais sur leur site je ne trouve pas de détailsprécissur la composition du kit... Si quelqu'un peut m'aider..
Merci.
Tu auras quelques infos dans le manuel, en regardant par exemple les consignes de sécurité et autres. La plupart de ces manuels sont téléchargeables sur les sites des fournisseurs. Par contre leur composition exacte... tu ne l'auras pas. Secret industriel
Ceci dit, à peu de choses près, on sait tous ce qu'il y a dans les solutions des kits surtout pour une technique aussi simple que l'extraction de plasmides. Dans les tampons de lyse tu as du SDS et de la soude (pH 12-13), dans la seconde solution de neutralisation tu as un agent acide, les solutions de lavages sont à bases d'alcool, le TE est du Tris-EDTA et la colonne contient une résile en silice.Envoyé par kamor
Petit complément, la solution acide contient certainement de l'acide acétique vu l'odeur, en plus du fait que c'est souvent cet acide qui est utilisé en biologie moléculaire. L'alcool des lavages permet de conférer une certaine hydrophobicité aux solutions de lavages. L'ADN interagissant avec la silice par des interactions polaires, un solvant polaire comme l'eau élue l'ADN (certain kit Qiagen utilise simplement de l'eau pour l'élution), pour les lavages, l'alcool permet ainsi le maintien de l'ADN sur la silice.
Nouveau problème: je ne sais pas à quoi correspond le buffer P1, P2, P3, QBT, QC, QF...
J'utilise le même type de kit mais chez Sigma et ils sont aussi avares en infos... Mais en fait à mon avis c'est simple: regardes les protocoles dits classiques d'extraction de plasmides et il n'y a pas de mystères les kits sont fait avec les mêmes produits... Là ou il y a de la technologie c'est plus au niveau de la matrice de la colonne.
P1 : tampon de resuspensionNouveau problème: je ne sais pas à quoi correspond le buffer P1, P2, P3, QBT, QC, QF...
P2 : tampon de lyse
P3 : tampon de neutralisation (neutralise le SDS d'après ce que j'ai compris)
QBT : Tampon d'équilibration de la colonne
QC : tampon de lavage
QF : tampon d'élution
Normalement c'est écrit sur les bouteilles et il y a une notice vendue avec le kit...
La lyse est faite dans un tampon contenant du Chlorure de Guanidinium entre 3M et 6M.
Bonjour, alors je ne suis pas là pour apporter ma pierre à l'édifice mais pour poser plus de question : j'aimerais savoir approximativement la composition des différents "buffers", donc 1, 2 et 3, afin de pouvoir expliquer dans mon "article" pourquoi ils permettent la resuspension, la lyse, etc.
Merci d'avance, je galère sérieusement à trouver ça sur le net!
salut
excusez moi, mais si vous avez fait un TP sur ca il me semble que vous devriez quand meme en avoir une petite idée!
Ce sont quand meme des questions bateaux, qui ont toutes les chances d'avoir été expliquées lors du TP!
Quant a petitelectron, ca serait sympa de ne pas réouvrir une discussion sur le meme sujet à chaque fois!
YOyo
PS/ en tapant lyse alcaline sur google, il faut moins de 30s pour trouver un lien expliquant tout!... allez un peu d'effort vous en etes capable!
pour ce qui est des aides en TP, y en a pas, ils considèrent qu'on doit se démerder tout seul en L3, logique. Bon j'ai réussi à trouver grosso-modo la compo des différents tampon sur google grâce à votre aide, mais maintenant j'aurais besoin de savoir quel action a le glucose dans le tampon de resuspension, j'ai réussi à piger pour le tris-HCl et l'EDTA.
je suis enceinte et je veux savoir si l'utilisation du kiy Qiagen est deconseillee ou pas pour les femmes enceintes? Je suis au 1er trimestre de grossesse
merci d'avnce
Salut
C'est sur qu'il vaut mieux éviter de le boire.... mais ca meme si tu n'es pas enceinte
Sinon il y a une notice avec la composition des différents tampons. Tu peux aussi te renseigner à la médecine du travail.
YOyo
