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cinétique enzymatique en fluorescence



  1. #1
    khanette

    cinétique enzymatique en fluorescence

    Bonjour à tous
    je souhaite caractériser une enzyme (retrouver les constantes cinétique) en suivant l'apparition d'un produit fluorescent.
    comment est ce que je peux procéder?

    -----


  2. #2
    ***Audrey***

    Re : cinétique enzymatique en fluorescence

    Bonjour,
    Il faut juste suivre l'évolution de ce produit à condition qu'il soit le résultat de l'action de cet enzyme à étudier.

    Est-ce suffisant comme réponse Khanette ?

  3. #3
    vpharmaco

    Re : cinétique enzymatique en fluorescence

    Pour développer un peu la réponse précédente:

    Si on fait l’hypothèse que l'enzyme suit une cinétique michaelienne, il te faut mesurer la vitesse initiale, vi, de formation du produit fluorescent.
    En faisant varier la concentration en substrat, tu pourras tracer vi=f([substrat]) et 1/vi=f(1/[substrat])
    Ces graphs te permettrons de déterminer la KM, Vmax, kcat de ton système substrat-enzyme.
    Tout est explique ici :http://fr.wikipedia.org/wiki/%C3%89q...chaelis-Menten

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