cinétique enzymatique en fluorescence

[invitec89008af]

Bonjour à tous
je souhaite caractériser une enzyme (retrouver les constantes cinétique) en suivant l'apparition d'un produit fluorescent.
comment est ce que je peux procéder?
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[invite0af3b3ef]

Bonjour,
Il faut juste suivre l'évolution de ce produit à condition qu'il soit le résultat de l'action de cet enzyme à étudier.

Est-ce suffisant comme réponse Khanette ?

[vpharmaco]

Pour développer un peu la réponse précédente:

Si on fait l’hypothèse que l'enzyme suit une cinétique michaelienne, il te faut mesurer la vitesse initiale, v_i, de formation du produit fluorescent.
En faisant varier la concentration en substrat, tu pourras tracer v_i=f([substrat]) et 1/v_i=f(1/[substrat])
Ces graphs te permettrons de déterminer la K_M, V_max, kcat de ton système substrat-enzyme.
Tout est explique ici :http://fr.wikipedia.org/wiki/%C3%89q...chaelis-Menten