Marquage IF de l'enveloppe nucléaire

[invite83d6a0d8]

Bonjour,

Je souhaite mettre en évidence le contour de l'enveloppe nucléaire.
Pour ceci, nous utilisons un anticorps dirigé contre l'emerine, protéine liant les lamines de l'enveloppe.
Sur tissu, le marquage IF est spécifique, beau et correspond à nos attentes. Mais nous ne parvenons pas à le mettre au point sur cellules déposées sur cytospin. Peut-être l'anticorps n'accède pas à l'intérieur du noyau. J'utilise du triton pour la perméabilisation mais ceci n'est peut-être pas suffisant. Si vous aviez des conseils à m'apporter. Merci
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[invite71f23525]

Bonjour et bienvenue sur Futura Sciences,

Tu peux peut-être essayer de faire ton marquage sur des cellules adhérentes afin de voir si le cytospin n'est pas en cause. J'avais un marquage qui ne marchait pas sur cellules passées au cytospin, leur morphologie semblait compromise par cette méthode.
Tu peux aussi essayer de changer l'agent de perméabilisation et essayer avec de la saponine.

Cela ne m'étonnerait pas que ton problème soit lié au cytospin.