Complexe Enzyme-Substrat

[seb--72]

Bonjour à tous, avec un pote on bloque à une question sur le complexe enzyme substrat.

On se propose d'étudier par la méthode de dialyse à l'équilibre, l'affinité d'une enzyme E pour un analogue structural S de son sustrat (cet analogue structural S se combine réversiblement à l'enzyme, mais n'est pas métabolisé)
On détermine que 50% des sites métaboliques sont liés à S lorsque la concentration en substrat libre à l'équilibre est égale à 2,25µg/mL
Calculer la constante d'affinité du complexe ES.
Donnée: La masse molaire de S est égale à 375 g/mol

Si vous avez des sites sur le net qui peuvent nous orienter aussi, on est preneur!

Merci d'avance!
-----

[seb--72]

Quelqu'un pour nous aider?!

[TheBigBangTheory]

Salut !

Pour déterminer l'affinité, il faut déterminer la constante de Michaelis (Km) qui caractérise la stabilité du complexe ES. Elle est en général comprise entre 10^(-6) molaire et 10^(-1) molaire.
Km = [E]*[S] / [ES], avec : [E] = concentration en enzyme libre ; [S] = concentration en substrat non lié à l'enzyme ; [ES] = concentration en complexe enzyme-substrat. (Le tout, à l'équilibre)

Je te guide :
- Calcule la concentration en substrat, tu as toutes les données. Tu devrais trouver : 6,5.10^(-5) mol.L^(-1).
- Tu sais qu'à l'équilibre, tu as autant d'enzyme liée au substrat que d'enzyme non liée. Donc, tu peux affirmer que : [E] = [ES]
- Donc, par simplification : Km = [S] = 6,5.10^(-5) mol.L^(-1)

L'affinité est l'inverse du Km, soit 1/Km.

Voili voilou !

[seb--72]

Salut merci de ta réponse!

J'ai eu le même raisonnement que toi, d'abord calculer la concentration et dire qu'elle est égale à la constante.

Par contre je trouve une Concentration molaire à 6E-6 mol/L

[A voir en vidéo sur Futura]

[TheBigBangTheory]

Euh oui, pardon, j'ai fait ça sur mon brouillon, j'ai dû prendre la valeur d'un autre calcul qui n'avait rien à voir sans faire exprès.
C'est effectivement 6.10^(-6) M.