[Méthodologie] Question technique sur la RT-PCR

[John78]

Bonjour

Est-ce quelqu'un pourrait me dire si c'est possible de faire de la RT-PCR sur des ARN de grande taille entre 5 et 10kb et plus ? N'y a t'il pas des risques de décrochage de la transcriptase inverse aboutissant à des ADNc tronqué, plus court ? Tout site web sur la question est le bienvenu. Merci

John
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[Yoyo]

salut

si et ce probleme est bien l'evenement majoritaire qui se produit durant une RT.
Ceci dit pour la SuperscriptII RNaseH-, la brochure parle d'une taille max de 9.5Kb, mais dans leur gels ils testent untiquement jusqu'a 7.5Kb en RT-PCR.

Je pense que ca depends bcp de l'optimisation des conditions de reactions.
Cette enzyme est vendue par Life Technologies, http://www.lifetec.com
(voir le technical bulletin 18064-3)

Yoyo

[John78]

Merci, c'est bien ce que je craignais...

J