probleme de description du protocole de digestion

[hayemaker]

Salut tout le monde
J'ai un petit exercice un peu compliqué(ca demande du pratique plus qu etre fait theoriquement),c etait pas clair bon le voila:

-On veut digerer 2ug d un fragment d'ADN lineaire par les enzymes de restriction EcoRI et/ou BamHI.La solution d'ADN est a 0.5ug/uL.
-Les enzymes sont a la concentration de 4000u/ml dans une solution de glycerol a 50% sachant que:
-une unité(1u) d enzyme digere 1ug d'ADN en 1h a 37°C et que pr etre certain que la digestion est totale,on utilise 2fois la quantité d'enzyme.
-pour que l'enzyme fonctionne correctement,la [GLYCEROL]ne doit pas execerer 5%
-L'enzyme est fournie avec un tampon de digestion 10fois plus concentré.
La question c'est decrire le protocole de digestion simple (avec un seul enzyme) et pour double digestion(càd avec les 2 a la fois) en respectant les conditions.

merci pour votre aide!je serai reconnaissant
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[Flyingbike]

c'est pas dur :

quel volume d'ADN te faut il pour en avoir 2µg ?
quel quantité d'enzyme faut il pour digérer 2µg ? quel volume ça représente ?

A cette étape la, quelle est la concentration de glycérol ? plus de 5% ?
si oui, de combien faut il diluer pour atteindre les 5% ?

quel volume total ça représenterait ? du coup, combien de tampon concentré pour avoir une concentration finale de 1X ?

ensuite, compléter avec de l'eau.