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Broyât de bactérie ?



  1. #1
    Rubisco59

    Broyât de bactérie ?


    ------

    Bonjour bonjour =)

    Ma question va paraitre vraiment stupide ( je le conçois), enfin bref.
    Je me demandais quelle est la procédure à suivre pour réaliser un broyât de bactérie à Gram positif (je travaille sur B. thuringiensis) ? Il me semble que je dois utiliser un tampon (vague souvenir).

    Quelqu'un pourrait-il m'éclairer sur la façon d'y procéder ?
    Merci d'avance =)

    -----

  2. #2
    noir_ecaille

    Re : Broyât de bactérie ?

    Ne vaudrait-il pas mieux commencer par lyser la paroi avec du lysozyme ?
    Ensuite, petite centrifugation à froid, élimination du surnageant, redissolution en liquide tamponné isotonique -- le tout répété trois fois pour éliminer l'enzyme et la paroi.
    Enfin une dernière centrifugation à froid, élimination du surnageant, écrasement du culot ?

    Ça devrait avoir quelques résultats

    On peut tenter une unique centrifugation à froid de l'inoculat, élimination du surnageant, puis broyage direct si on souhait conserver la paroi -- à voir si ça donne des résultats.
    "Deviens ce que tu es", Friedrich W. Nietzsche

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