Questions sur les éléments d'un vecteur de clonage

[invite49514c8d]

Bonjour à vous,

J'ai quelques questions concernant les différents éléments d'un vecteur de clonage type plasmide.

-En aval du MCS, des codons stop permettent d'arrêter la transcription du gène d'intérêt. Or, étant donné qu'il n'y a qu'un seul promoteur inductible en amont du MCS, comment les autres gènes (gène de résistance à un
antibiotique et gène répresseur du promoteur) pourront eux être transcrits?

-Y a t-il une reprise malgré tout de la transcription ? et si oui de quelle façon?

-Une fois la transfection effectuée, on doit sélectionner les bactéries ayant bien reçus ce plasmide sur milieu avec antibiotique. Encore une fois, ce "fameux" codon stop empêche selon moi la transcription du gène de résistance et donc ne permet pas aux bactéries de devenir résistantes ..


Je me doute bien que ces gène sont nécessairement transcrits également. Mais comment? Je reste bloquer sur la présence de ce codon stop en aval du gène d'intérêt inséré et de la présence d'un unique promoteur.

Je vous serais reconnaissant si vous pouviez m'apporter votre aide

Bonne journée !
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[invite444a246d]

Juste en survolant ta question, je vois une grosse confusion dans tes idées. En aucun cas un codon stop induit la terminaison de la transcription.

Terminaison de la traduction et transcription répondent à deux mécanismes différents.

Cordialement, Cham

[Flyingbike]

L'expression des différents gènes contenus dans un tel plasmide est indépendante. Même s'il y a en effet un codon stop après le MCS, il y a des promoteurs indépendants pour chacun des autres gènes comme celui de résistance. Du coup je pense que cela répond a toutes tes questions, sinon tu peux toujours continuer la discussion.

[invite49514c8d]

Merci à vous 2
C'est beaucoup plus clair pour moi !

[A voir en vidéo sur Futura]