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electroporation



  1. #1
    Kyle_XY

    electroporation

    Rebonjour à tous. J'ai quelques questions à propos de l'électrporation.
    J'ai trouvé ceci :
    - - Electroporation
    Dans cette méthode, les cellules en suspension dans la solution d’ADN sont soumises durant
    un instant très bref (0,01 à 0,02 sec.) à un champ électrique de forte intensité (environ 5000
    V/cm). Cela perturbe la perméabilité de la membrane plasmique, voire y crée des pores,
    permettant le passage d’ADN. Celui-ci ne se déplace pas uniquement par diffusion, mais aussi
    par électrophorèse. C’est la méthode la plus efficace pour transformer des levures.

    comment un champ électrique perturbe-t-il une membrane ?
    comment l'ADN peut entrer par "électrophorèse"?

    -----


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  3. #2
    noir_ecaille

    Re : electroporation

    La membrane cellulaire présente un gradient électrolytique grâce à différentes pompes ioniques comme la célèbre K+/Na+-ATPase.

    Cela crée une certaine force de tension (tension de surface ici) qui rend la membrane plus résiliente aux forces mécaniques -- par comparaison avec une goutte d'huile par exemple. Imaginons qu'on tende des câbles pour soutenir le tablier d'un viaduc

    L'électroporation va simplement jouer sur cette tension en l'augmentant. Sauf qu'à ce moment la tension est si forte que les ions passe au travers de la membrane, créant temporairement des pores. On pourrait faire aussi des trous dans le tablier d'un viaduc en raccourcissant l'un des câbles.

    Et enfin, comme pour une électrophorèse sur plaque, l'ADN est une molécule chargée qui migre en fonction du courant en traversant un milieu -- le gel d'électrophorèse ou présentement des cellules de levure.
    Dernière modification par noir_ecaille ; 14/03/2013 à 10h55.
    "Deviens ce que tu es", Friedrich W. Nietzsche

  4. #3
    Kyle_XY

    Re : electroporation

    Je ne suis pas sure de comprendre. C'est la pompe qui crée la tension superficielle ?

  5. #4
    noir_ecaille

    Re : electroporation

    C'est le gradient électrolytique -- entretenu par les pompes ioniques
    "Deviens ce que tu es", Friedrich W. Nietzsche

  6. #5
    Kyle_XY

    Re : electroporation

    Donc le courant électrique attire les charges qui maintenait le potentiel de repos de la membrane a l'équilibre et l'attraction crée temporairement des pores dans la membrane ?

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    noir_ecaille

    Re : electroporation

    C'est comme ça que je le comprends ^^
    "Deviens ce que tu es", Friedrich W. Nietzsche

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  10. #7
    lullane

    Re : electroporation

    Pour moi ce n'est pas un courant électrique qui attire des charges, mais le déplacement des charges qui craient un courant électrique. Les pores sont crées parceque la membrane se fissure à cause des décharges électriques.

  11. #8
    noir_ecaille

    Re : electroporation

    Faux : c'est une tension électrique qui attire les charges -- le courant ne mesure que le flux (la quantité de charge en mouvement).

    Et ce sont bien les ions qui perforent la membrane, pas d'hypothétiques fissures et il n'y a pas de "décharge" électrique (mouvement d'électrons) mais des mouvements (donc flux) d'électrolytes (= ions, particules chargées).
    Dernière modification par noir_ecaille ; 21/04/2013 à 14h09.
    "Deviens ce que tu es", Friedrich W. Nietzsche

  12. #9
    lullane

    Re : electroporation

    Vu que la perforation dans le cas d'une électroporation n'est pas irréversible il ne me semble pas juste de dire que les ions trouent la membrane plasmique de la cellule, ça doit être plutôt être un échange de charges non? Qui craient une affinité? notamment de la tête des phospholipides?

  13. #10
    noir_ecaille

    Re : electroporation

    L'échange de charge se fait avec l'échange d'électrolytes. Il n'y a pas plus d'affinité avec les phospholipides.

    Et qu'il y ait électroporation implique qu'il y a des trous (qui se résorberont) de la taille de pores mais des trous parce qu'il ne s'agit pas de pores protéiques -- juste de trous dans la membrane.
    "Deviens ce que tu es", Friedrich W. Nietzsche

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