Génie génétique - Méthode "phage display"

[invite1ee7d6fb]

Bonjour,

Je suis en train de lire un article scientifique où le chercher dis avoir identifier des peptides spécifiques aux sites de liaisons voulus pour ses nanoparticules. Bref, il "colle" des peptides spécifiques sur des nanoparticules, qui elles, vont aller se "coller" aux bons endroits dans le corps. Cette technique est en recherche pour améliorer l'imagerie médicale des tumeurs, entres autres.

Il dit qu'il a découvert ces peptides avec la méthode "phage display". Il a créé des banques avec des bactériophages et a trouvé des peptides spécifiques aux cellules voulues...

Je ne comprend pas bien cette méthode du "phage display"... quelqu'un s'y connait?

Merci,
Julien
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[invitebba2dde3]

Bonjour,
La méthode du phage display consiste a insérer un peptide sur la capside d un virus, les virus sont amplifiés en infectant des bactéries.
Les virus produit sont incubés en présence de la cible après lavage on récupère les virus accrochés, on les réamplifient et on recommence et on augmente la stringeance pour que seul les virus ayant la plus forte affinité pour la cible restent. Ensuite l ADN des virus est sequencé pour trouver le meilleur peptide.

[invite1ee7d6fb]

Ok merci... et pourquoi des phages? Quel est l'avantage des phages par rapport aux bactéries simplement?
Dans l'article j'ai cru comprendre qu'ils injectaient des phages directement dans l'organisme et les phages se "ralliaient" aux points d'intérêts... est-ce que ça fais du sens?

Voici l'extrait de l'article:
Blood vessels express molecular markers that distinguish the vasculature of individual organs, tissues, and tumors. Peptides that recognize these vascular markers have been identified by screening phage libraries in vivo, a procedure in which peptides direct phage homing to individual sites (5). This approach has led to the identification of a unique set of homing peptides with high in vivo selectivity (6–9). We have used homing peptides to target i.v.-injected qdots to specific vascular sites in mice (Fig. ​(Fig.1).1). One of these peptides binds to membrane dipeptidase on the endothelial cells in lung blood vessels (9), and the other two preferentially bind to tumor blood vessels (10) or tumor lymphatic vessels (11) and the tumor cells. Each of the peptides directed the qdots to the appropriate site in the mice, showing that nanocrystals can be targeted in vivo with an exquisite specificity.

Source: Akerman et al. PNAS, 1e octobre 2002, vol. 99, no. 20, 12617-12621

[invitebba2dde3]

Bonjour,
L'avantage des phages est qu'ils peuvent être clonés et multipliés rapidement et à faible coûts.
Pour l'article, on injecte pas les phages mais les peptides que l'on a identifié par la méthode du phage display.
Le peptide est couplé à un qDot sorte de mini christal fluorescent qui permet de localiser le peptide et donc de voir si il se lie bien à la cible !!

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite1ee7d6fb]

Merci beaucoup!