Répondre à la discussion
Affichage des résultats 1 à 5 sur 5

Marquage Annexine V/ PI Cytométrie: concentration cellulaire



  1. #1
    Clarinete95

    Marquage Annexine V/ PI Cytométrie: concentration cellulaire

    Bonjour à tous,

    J'ouvre une nouvelle discussion pour solliciter vos conseils en cytométrie en flux, n'en ayant encore jamais fait et devant monter une manip de marquage Annexine V/PI.

    D'après le protocole de mon kit (Sigma), il faut re-suspendre les cellules à une concentration de 10^6 cellules.
    Je veux évaluer l'apoptose et la mort cellulaire de mes cellules suite à différents traitements, le nombre de cellules vivantes sera donc différent d'un échantillon à un autre.
    A votre avis, dois-je re-suspendre chaque échantillon de façon à ce que chacun d'entre eux soit à une concentration de 10^6 cellules vivantes (ou vivantes et mortes non préférentiellement?), ou devrais-je tous les re-suspendre dans le même volume (calculé par exemple à partir du contrôle positif), afin de conserver une idée de la proportion de cellules vivantes/mortes?

    Merci d'avance pour vos réponses!

    -----


  2. Publicité
  3. #2
    random_postdoc

    Re : Marquage Annexine V/ PI Cytométrie: concentration cellulaire

    La concentration que te donne le kit est pour un marquage optimal, à priori 10^6 cellules totales/ml pour faire ton marquage dans 100µl, s'il y a trop de cellules le marquage peut perdre en efficacité.

    Et vu que tu travailles en proportions, le nombre de cellules importe pas tellement tant que t'en a assez pour enregistrer un nombre d'évènements adequat.

  4. #3
    Clarinete95

    Re : Marquage Annexine V/ PI Cytométrie: concentration cellulaire

    Donc il vaut mieux que je compte mes cellules dans chaque échantillon pour être sûre d'en avoir assez/pas trop pour chaque expérience?
    Et est-ce que c'est la concentration en cellules vivantes qui compte, ou cellules vivantes+mortes?

  5. #4
    random_postdoc

    Re : Marquage Annexine V/ PI Cytométrie: concentration cellulaire

    Cellules totales, donc vivantes+mortes.

  6. #5
    Clarinete95

    Re : Marquage Annexine V/ PI Cytométrie: concentration cellulaire

    Ah oui je n'avais pas vu, merci!

  7. A voir en vidéo sur Futura

Discussions similaires

  1. [Biologie Moléculaire] Concentration protéine cellulaire
    Par zimzum18 dans le forum Biologie
    Réponses: 2
    Dernier message: 06/10/2012, 07h23
  2. Tri cellulaire par cytométrie de flux
    Par mellymello dans le forum Biologie
    Réponses: 7
    Dernier message: 05/03/2012, 22h22
  3. [Biologie Cellulaire] Marquage à l'iodure de propidium pour suivi du cycle cellulaire
    Par Miny dans le forum Biologie
    Réponses: 1
    Dernier message: 09/11/2010, 23h47
  4. [Biochimie] Marquage cycle cellulaire et FACS
    Par bodum dans le forum Biologie
    Réponses: 1
    Dernier message: 02/04/2009, 16h51
  5. cytométrie
    Par marie5485 dans le forum Biologie
    Réponses: 0
    Dernier message: 25/04/2007, 10h26