bonjour j'ai besoin d'aide s'il vous plait pour un exercice sur l'activité des enzymes de restrictions :
afin de réaliser une banque de fragments d'ADNg double brin, on dispose de 20 µg d'ADNg que l'on digère par les enzymes de restrictions BaeGl ou Alul. Chacune de ces enzymes possède une activité de 10U/µL (1U coupe totalement 1µg de plasmide de 3000pb possèdant un site unique de restriction pour l'enzyme de restriction considéré en 1h à 37°C). Nombre d'Avogadero = 6.02*10^23. Les produits de digestion sont analysés par électrophorèse.
1) si la présence de site de restriction est aléatoire, expliquer en détaillant les calculs, combien de site de restrictions sont théoriquement présent sur ces 20µg d'ADN pour chacune de ces enzymes?
2) si l'on veut générer des fragments de 1000pb lors des 2 digestions indépendantes par ces enzymes, expliquer quel est le pourcentage d'ADN que l'on doit couper?
4) Expliquer en detaillant les calculs, quels volumes d'enzymes faudra-t-il utiliser?
S'il vous plait j'ai partiel demain et je n'ai pas la correction :/:
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