Bonjour a tous ,
s'il vous plait j'ai trouvé des problèmes avec l'iPCR, j'ai du mal a trouver la Tm adéquate pour faire la PCR1 et la PCR2.A chaque fois je ne trouve des smears comme résultat de la PCR nichée .SVP comment choisir la Th adéquate surtout que les Tm de mes amorces sont comme suit:
iPCR: amorce F 54C
amorce R 51C
nPCR : amorce F 55C
amorce R 58C
A quoi seraient du les smears de LA PCR nichée? Ceci est il en relation avec la qualité des produits de ligation?
Merci d'avance