Bonjour,
mon maitre de stage veut que je fabrique un tampon d'extraction (appelé dans le protocole tampon de diffusion) pour réaliser mon extraction d'ARN d'un gel de polyacrylamide car il n'est pas fourni dans le kit.
Il faut que je fasse un volume final de 50mL: 500mM d'acétate d'ammonium, pH8, 0,1% SDS, 1mM EDTA, 10mM d'acétate de magnésium.
Je suppose qu'il faut que j'utilise les formules de chimie comme n=m/M, ce qui remonte à loin mais je vois pas trop comment faire.
J'ai trouvé déjà ça: 1mM EDTA = 0,29224 g/mol ; 500mM acétate ammonium = 38,5 g/mol et 10mM acétate magésium = 1,424g/mol.
Au début j'ai fait:
pour 50mL, pour EDTA --> 50x0,29224/1000 = 0,015g
pour 50mL, pour acétate ammonium --> 50x38,5/1000 = 1,925
pour 50mL, pour acétate magnésium --> 50x1,424/1000 = 0,07
Mais je ne suis vraiment pas sûre de ce que j'ai fait donc si vous pouviez m'indiquer si j'ai bon ou si je fais totalement fausse route s'il vous plait...
Pour le SDS, j'ai déjà une solution prête à 10% donc faudra que je dilue au 100e, soit 0,5mL = 50µL
Pour le pH8, je ne sais pas du tout comment faire.
Et après avoir obtenu tout ça, je complète à 50mL avec quoi?
Voilà j'espère que vous pourrez m'aider.
Merci d'avance
Bonne journée
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