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Conditions d'une culture cellulaire animale



  1. #1
    Oib

    Conditions d'une culture cellulaire animale

    Bonjour, je voudrai vérifier l’authenticité de ma réponse à cette question : Dans quelles conditions s'effectuent la culture cellulaire?

    la culture des cellules animales se fait dans des milieux de culture qui doivent répondre aux exigences des cellules animales :
    -Eau
    - Ions minéraux à des concentrations adéquates (l'osmolarité du milieu doit être celle du sérum physiologique soit 9g par L de NaCl)
    -Sources de carbone et d'énergie, source d'azote
    - facteur de croissance (acides aminés essentiels, vitamines, acides gras tel que l'acide arachidonique)
    - des gaz : le dioxygène les cellules étant aérobies strictes, le dioxyde de carbone en général car les tissus sont en permanence contact dans une atmosphère contenant du du dioxyde de carbone
    -d'un pH : maintenu constant vers 7.4 (système tampon CO2/HCO3- ou phosphate
    -Des facteurs cellulaires hormonaux comme les interleukines
    - Des antibiotiques : Pénicilline G, streptomycine
    -Antifongique : amphotéricine B
    Une température adéquate 37°C, 84% d'humidité, 5% de CO2 formant un système tampon avec HCO3- du milieu et permettant ainsi un maintien du pH de culture à 7.2-7.3
    Les cultures se font dans un incubateur CO2 (étuve à CO2) ou en présence de carbogène.

    -----


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  3. #2
    TanguyE

    Re : Conditions d'une culture cellulaire animale

    Bonjour,

    Les antibio et antifongiques ne sont pas indispensables. C'est un garde-fou, mais en théorie si on travaille proprement, y'a pas trop de risques de contaminations.

    Tout le reste me parait correct.

  4. #3
    Saswordz

    Re : Conditions d'une culture cellulaire animale

    Bonjour,

    Assez d'accord avec TanguyE bien que les antibiotiques et antifongiques sont presque toujours ajoutés surtout dans les labos privés, et quand ce sont des "novices" qui réalisent les cultures.
    Sauf erreur de lecture de ma part tu ne parles pas de témoin colorimétrique pour le pH. Souvent on ajoute ce genre de composant pour voir quand le milieu devient trop acide.

  5. #4
    Oib

    Re : Conditions d'une culture cellulaire animale

    Oui, j'ai oublié de citer l'indicateur de pH (en général le rouge de phénol) Il est rose au départ. Son virage au rouge indique une alcalinisation signe souvent la présence de champignons, alors que son virage au jaune révèle plutôt des bactéries

  6. #5
    fifikz

    Re : Conditions d'une culture cellulaire animale

    bonjour,

    Cela me semble en général juste, mais (il y en toujours un malheureusement), l'usage d'antibio en tout genre n'est pas forcément nécessaire (cela à déjà été dit plus haut) et le maintien à 5% de CO2 n'est pas une règle pour les cellules animales. Par exemple, il me semble que les mélanocytes se cultivent avec un taux de CO2 bien inférieur.
    Pour conclure, vous énumérez des règles générales justes, mais, il ne vous faut pas oublier qu'il faut impérativement adapter les conditions de cultures à ce que vous souhaitez faire pousser (par le biais des recommandations de votre fournisseur ou grâce à votre propre expérimentation), sinon...
    ne pas avoir de règles c'est déjà en avoir une

  7. A voir en vidéo sur Futura

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