Chromatographie échageuse d'ions

[Came31]

Bonsoir,

On me donne le peptide suivant : Lys-Gly-Leu-Pro-Arg-His et on me demande s'il est retenu par une résine échangeuse d'anion ou de cation.
Voilà mon raisonnement, je sais d'aprés la correction que je me suis trompée quelque part :
Il est indiqué que le pH est trés basique, par conséquent les acides aminés chargées (Lysine et arginine) seront sous forme déprotonée et puisqu'ils contiennent respectivement une fonction amine et guanidine, on obtiendra NH2. Or dans la correction il est noté que ce peptide est retenu par une résine échangeuse d'anions.
Je ne comprend pas. Si son radical n'est pas chargé comment peut-il être retenu ? A moins qu'il que quelque chose m'ait échappé (ce qui est fort probable ) Pour moi, un acide aminé basique est chargé positivement à un pH acide et il est neutre à pH basique, je me trompe ?
Et ne suis pas sûre d'avoir compris le principe : un peptide chargé positivement est bien retenu par une résine anionique ou par une colonne échangeuse de cations ?
Voilà, merci beaucoup !
-----

[Aqualung]

Bonjour,

Tout d'abord on parle d'acide aminés chargés positivement ou négativement, pas de basique ou acide.

Pour savoir la charge des acides aminés, on respecte cette règle simple :

pH < pI : charge nette positive
pH > pI : charge nette négative

Ici tu dis que le pH est très basique, donc supposément très élevé et sans doute supérieur au pI. Du coup on suppose que les acides aminés sont chargés négativement.

Des charges négatives sont retenues par des charges positives (échangeuse anioniques).

Voilà comment on résout ce genre d'exercice avec une règle très simple.

[invitefda09096]

bsr, j’espère que vous que vous peux m'aider de resolu ce problème et merci d'avance
exercice:
on séparent deux polypeptides A (phi= 5.2) et b (phi=6.8) par chromatographie sur colonne de DEAE-cellulose (échangeuse d'anions). 1 ml du mélange est déposé en tête de colonne, le ph initial est de 8.8 .l'élution est effectuée par un gradient décroissant de ph ; les fractions recueillies sont analysées par spectrophotométrie a 280 nm.
question:
1) décrire le comportement des deux peptides tout au long de l'expérience.
2) quel est l’intérêt de la spectrophotométrie dans cette expérience et pourquoi utilise -t-on la longueur d'onde de 280 nm?
3) définir la chromatographie sur (échangeur d'ions et particulièrement sur colonne échangeuse d'anions.

[JPL]

Commence par lire http://forums.futura-sciences.com/bi...-exercice.html.

[A voir en vidéo sur Futura]

[invitefda09096]

ok et merci