Biologie moléculaire - Stringence

[invite46adcff7]

Bonjour,

Je ne comprends pas très bien la différence entre une hybridation spécifique et une hybridation non spécifique dans le cadre de la complémentarité des bases dans l'ADN. Pourriez-vous m'éclairer s'il vous plait ?

Merci beaucoup !
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[invitea4b00eb7]

Bonjour,

La spécificité et la non spécificité ne provient pas d'une "non" complémentarité des bases. Le paramètre de spécificité correspond au fait que seulement les séquences avec un taux d'identité élevé s'hybrident.
Dans un milieu peu stringent, on va favoriser les hybridations non spécifiques, en plus des hybridations spécifiques bien sur... mais cela peut générer beaucoup de bruit de fond. En fait, à faible stringence, on va "permettre" l'hybridation des brins qui n'ont pas un pourcentage d'identité élevé donc des hybridations entre des séquences plus ou moins différentes.
En augmentant la stringence du tampon ou alors en augmentant la température utilisée lors de l'hybridation, on va sélectionner les hybridations entre les séquences qui ont un fort pourcentage d'identité. En effet, ces dernières pourront réaliser des interactions hydrogènes plus fortes sur l'ensemble de l'hybridation et donc l'hybridation sera plus stable dans un tampon stringent ou à haute température.

En espérant avoir répondu à votre question.